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背景重症肌无力(myasthenia gravis, MG)是神经系统常见的自身免疫性疾病,神经肌肉接头处传递障碍是其特征。目前认为其发病机制是体内免疫异常产生的乙酰胆碱受体抗体(acetylcholine receptor antibody, AChR-Ab)损伤了突触后膜乙酰胆碱受体,从而致病。但研究发现约10-20%的MG患者为乙酰胆碱受体抗体阴性,然而这部分患者的发病机制仍不清楚。许多学者在AChR-Ab(-)的MG患者血清中发现了一些其它抗体,其中以肌肉特异性酪氨酸激酶抗体(muscle specific receptor tyrosine kinase antibody, MuSK-Ab)的发现意义最为重大,约4-49%的AChR-Ab(-)MG患者可以检测到MuSK-Ab。且MuSK-Ab (+)MG患者临床表现与AChR-Ab(+)MG患者有所区别,常以眼-延髓肌无力为首发和主要症状,这与线粒体肌病的主要受累肌群极为相似。新近的研究发现,在MG患者特别是MuSK-Ab (+)MG患者的肌肉酶组织化学染色中,有显著的线粒体功能异常的特征。由此我们提出假设：重症肌无力的发病机制除了有免疫机制的异常,极可能还有线粒体功能异常的参与。本课题就以线粒体功能异常为切入点对重症肌无力进行研究,旨在探讨MG是否存在线粒体功能的异常,若存在是否与抗体类型相关。第一部分：MG患者血清抗体检测及外周血单个核细胞线粒体动力学观察目的探讨不同血清抗体类型MG的临床特征,并观察其线粒体动力学。方法应用放射性免疫沉淀法检测62例MG患者血清中的AChR-Ab和MuSK-Ab水平。依据检测结果,把本研究组分为AChR-Ab(+)组、MuSK-Ab(+)组、AChR-Ab(-)/MuSK-Ab(-)组,比较3组患者的临床特征；对其中6名患者的外周血提取单个核细胞,线粒体荧光探针标记后,激光共聚焦显微镜下观察其线粒体动力学。结果在纳入的62例患者中,51例AChR-Ab阳性(82.3%),1例MuSK-Ab阳性(1.6%),其AChR抗体检测为阴性,占AChR-Ab阴性患者的9.1%(1/11)。此例MuSK-Ab(+)患者为老年男性,主要表现为延髓肌受累,无胸腺异常。AChR-Ab(+)MG和AChR-Ab(-)/MuSK-Ab(-)MG两组的性别和发病年龄无统计学差异,首发症状多为眼外肌麻痹可伴有胸腺的病变,表现为胸腺增生或胸腺瘤。62例患者的AChR-Ab水平与患者病情严重程度相关(P=0.045)；在6例行线粒体动力学观察的MG患者中5例出现异常,其中2例AchR-Ab检测为阳性,3例阴性,MuSK-Ab检测均为阴性。结论MuSK-Ab仅出现在AChR-Ab阴性患者的血清中。MuSK-Ab阳性的患者主要表现为延髓肌受累,不伴有胸腺的病变；MG患者外周血单个核细胞可见线粒体动力学异常。第二部分重症肌无力患者肌肉线粒体功能的研究目的研究MG患者肌肉组织的线粒体功能。方法对9例MG患者、9例CPEO患者以及9例正常对照的肌肉进行酶组织化学染色,在显微镜下观察染色情况以判断其线粒体功能；采用低温差速分离法提取以上肌肉标本的线粒体。用比色法定量测定线粒体内膜上呼吸链复合物I-V (CI-CV)以及柠檬酸合成酶(CS)的活性。MG和CPEO组分别与正常对照组比较CI/CS、CII/CS、CIII/CS、CIV/CS、 CV/CS的活性变化,以判断线粒体氧化磷酸化功能。结果MG和CPEO患者肌肉酶组织化学染色结果均发现细胞色素C氧化酶(COX)活性缺失肌纤维,提示线粒体功能的异常；线粒体呼吸链复合物活性分析发现MG患者存在复合物Ⅳ,即COX活性明显降低。而CPEO患者存在呼吸链复合物Ⅲ和Ⅳ活性的同时降低。结论本组MG患者肌肉组织中存在线粒体功能的异常。结论：1.本研究组中MuSK-Ab仅出现在AChR-Ab阴性患者的血清中。其阳性率为9.1%。MuSK-Ab阳性患者主要表现为延髓肌无力,无胸腺异常。而AChR-Ab(+)和AChR-Ab(-)/MuSK-Ab(-)两组,首发症状多为眼外肌麻痹可伴有胸腺异常。2.本组MG患者外周血单个核细胞存在线粒体动力学的异常,表现为分裂过度化,线粒体形态缩短,在不同血清抗体类型患者均可出现。3.本组MG患者肌肉组织中存在线粒体功能的异常。表现为肌肉病理酶组织化学染色发现COX阴性纤维。和线粒体呼吸链复合物Ⅳ(COX)活性与正常对照组相比明显降低。