论文部分内容阅读
随着现代农业的发展,农药在我国粮食、水果、蔬菜的生产中发挥着日趋重要的作用,而农药不合理使用也导致了农产品中的农药残留超标,影响了人民食用安全和农产品贸易。因此,简便、经济、快速的农药残留快速检测技术的研究和应用对于保障我国的食品安全具有重要意义。丁酰胆碱酯酶(Butyrylcholinesterases,BChE)活性受有机磷及氨基甲酸酯类农药的特异性抑制,BChE活性变化是重要的农药毒理学指标,可作为农药毒性的生物标记物。本文以鸡血清为研究对象,对鸡血清BChE进行分离纯化,并对其基本酶学性质进行了研究。进而以七种有机磷和六种氨基甲酸酯类农药为抑制剂,对比研究了鸡血清BChE和商品化的马血清BChE的农药敏感性。研究结果如下:1.鸡血清BChE经DEAE Sephadex A-50离子交换和Sephacryl S-200分子筛层析后,比活力由0.0628μmol/min·mg提高到2.3689μmol/min·mg,纯化37.72倍,回收率为31.69%。纯化后的酶除去了大量杂蛋白。2.鸡血清BChE的Km为60.68μmol/L,碘化硫代丁酰胆碱对该酶无过量底物抑制效应,该酶最适反应pH为8.0,最适反应温度为35℃,对毒扁豆碱敏感性高,对盐酸多奈哌齐敏感性低。3.不同纯度的鸡血清BChE对农药的抑制率基本相同。4.通过测定鸡血清BChE和马血清BChE对七种有机磷农药的IC50值,可得以下结论:鸡血清BChE对七种有机磷农药的敏感性从强到弱依次为:速灭磷>敌百虫>敌敌畏>磷胺>久效磷>甲拌磷≈对硫磷;鸡血清BChE对甲拌磷、对硫磷极不敏感。马血清BChE对七种有机磷农药的敏感性从强到弱依次为:速灭磷>敌百虫>磷胺>敌敌畏>甲拌磷>久效磷>对硫磷。5.通过测定鸡血清BChE和马血清BChE对六种氨基甲酸酯类农药的IC50值,可得如下结论:鸡血清BChE对六种农药的敏感性从强到弱依次为:涕灭威>灭多威>速灭威>克百威>异丙威>丁硫克百威;且鸡血清BChE对丁硫克百威极不敏感。马血清BChE对六种农药的敏感性从强到弱依次为:丁硫克百威>克百威>涕灭威>灭多威>速灭威>异丙威。