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实验目的: 研究阿扎胞苷诱导多发性骨髓瘤细胞死亡的机制;用蛋白质组学研究阿扎胞苷处理多发性骨髓瘤细胞前后蛋白质的变化;发现多发性骨髓瘤治疗的新靶点。 实验方法: 通过形态学、DNA片段分析、氧化应激(ROS)水平检测及流式细胞术分析阿扎胞苷诱导多发性骨髓瘤细胞死亡的机制。培养多发性骨髓瘤细胞系U266、RPMI8226、NCI-H929，用蛋白质组学分析阿扎胞苷处理三种多发性骨髓瘤细胞前后蛋白质水平的改变，并用westernblot验证发生变化的主要蛋白，对疑有相互作用的蛋白进行免疫共沉淀分析。 实验结果: 1.阿扎胞苷通过氧化应激诱导多发性骨髓瘤细胞坏死。 2.多发性骨髓瘤细胞坏死的蛋白质组学分析结果和细胞结合血清白蛋白现象的鉴定。 3.在坏死的多发性骨髓瘤细胞中氧化应激诱导线粒体和内质网特异的分子伴侣蛋白过表达。 4.坏死诱导多发性骨髓瘤细胞向培养基中释放HSP90和HSP71。 结论: 阿扎胞苷和过氧化氢通过氧化应激诱导多发性骨髓瘤细胞坏死，导致培养基中牛血清白蛋白富集的现象及内质网和线粒体分子伴侣蛋白的上调，说明线粒体和内质网是细胞内氧化应激的主要攻击靶点。骨髓瘤细胞经阿扎胞苷处理后HSP90和HSP71明显下调，同时被释放到培养基中。HSP60可能成为多发性骨髓瘤治疗的新靶点。