非酒精性脂肪肝(nonalcoholicfattyliverdieases，NAFLD)是病理组织学改变与酒精肝相似，具有脂肪变性、肝细胞损伤及炎症细胞浸润，但无明确过量饮酒史的一种慢性肝病。其疾病谱随病程的进展表现不一，包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎(nonalcoholicsteatohepatitis，NASH)、脂肪性肝纤维化和脂肪性肝硬化4个病理过程。NASH是NAFLD向肝纤维化和肝硬化发展的重要中间环节。由于NASH动物模型的缺乏，严重阻碍了对NASH发病机制、预防和治疗的研究。其发病机制至今未明，目前临床上主要使用调血脂药联合肝细胞保护剂或抗氧化剂进行NASH的防治，但安全性和疗效尚需进一步评价。 豹皮樟，又名老鹰茶，系樟科木姜子属毛豺皮樟(LitseaCoreanalevel)的叶，是我国南方各民族民间长期饮用的一种植物代用茶，具有清凉止渴、解毒消肿、明目健胃等功效。老鹰茶中含有多种活性成分，经我院天然药物化学教研室研究，确定了豹皮樟的有效部位为总黄酮(Totalflavonoids)。目前关于老鹰茶的实验研究资料较少，其药理作用仅见抗氧化实验研究，我们前期研究表明豹皮樟总黄酮(totalFlavonoidsofLitseaCoreanaLevel，TFLC)具有显著的抗炎免疫作用。 本文首先通过改进脂肪乳剂灌胃的方法建x~_SD大鼠NASH模型，在此基础上进一步研究了豹皮樟总黄酮对NASH的预防作用及其部分机制，主要内容概括如下： 1．SD大鼠NASH模型的建立 通过改进配方的脂肪乳剂灌胃的方法诱导大鼠NASH模型。比较了猪油和花生油对大鼠脂肪肝形成的影响，结果显示，猪油和花生油造模大鼠血清ALT、AST、TC、LDL-C及肝脏TC、TG均显著增高；花生油造模还可升高大鼠血清TG、FFA和肝脏FFA，降低血清HDL-C。病理组织学检查提示，各模型组大鼠肝细胞呈现弥漫性脂肪变性，花生油模型组并有炎症病灶。对花生油模型的进一步研究表明，模型组产生了明显的胰岛素抵抗，肝脏细胞色素CYP2E1表达明显增高而过氧化物酶体增生物激活受体α(peroxisomeProliferator-activatedreceptorα，PPAR仅)表达显著降低。提示采用花生油是更好的诱导大鼠模型的方法。 2．TFLC对SD大鼠NASH的预防作用 给予SD大鼠脂肪乳剂诱导NASH模型的同时给予TFLC(100、200、400mg／kg)，与模型组比较，TFLC能显著降低大鼠肝脏指数，血清ALT、AST、LDL-C、TC、TG、FFA和肝匀浆TC、TG、FFA水平，并显著升高血清HDL-C。病理组织学检查结果表明给予TFLC后可明显减轻肝脏脂肪变性程度，并减轻炎症反应。以上结果提示：TFLC对由高脂乳剂诱导的SD大鼠NASH有明显的预防作用。 3．TFLC对SD大鼠NASH预防作用的机制研究 与模型组比较，TFLC显著降低大鼠血清NO、TNF-c~，肝匀浆MDA含量，升高血清瘦素(Leptin)、胰岛素(INS)水平，并增加肝匀浆SOD活性。同时TFLC抑制肝脏细胞色素CYP2E1表达而升高PPAR~的表达。电镜对肝细胞超微结构观察结果显示，给予TFLC后线粒体肿胀程度明显减轻，结构较模型组清晰。以上研究结果提示：TFLC对SD大鼠NASH的预防作用可能与其抗脂质过氧化，抑制TNF-{~产生，调节Leptin、INS水平，抑制肝脏CYP2E1表达而上调PPARα表达和对线粒体的保护作用有关。 4．TFLC对SD大鼠腹腔巨噬细胞和Kupffer细胞功能的影响 TFLC明显抑制体外LPS刺激大鼠腹腔巨噬细胞NO生成，抑制LPS诱导NASH大鼠Kupffer细胞核NF-r．B和胞浆iNOS表达。提示：TFLC预防NASH形成与其抑制Kupffer细胞活性有关。而PPARo[非竞争性抑制剂MK886可部分翻转TFLC对NASH大鼠Kupffer细胞核NF-r．B和胞浆iNOS表达的抑制作用。提示TFLC不但可以上调肝组织PPARα的表达，而且对Kupffer细胞PPARα受体有激活作用。TFLC的抗炎免疫作用与其激活PPARα的途径有关。 以上实验结果综合表明，通过改进脂肪乳剂配方，采用以花生油为主配制的高脂乳剂灌胃的方法可成功诱导出与人类发病机制相近的大鼠NASH模型。TFLC对高脂乳剂诱导的大鼠NASH形成具有明显的预防作用。其作用机制可能与其调节脂质代谢，抗氧化，抑制过量NO和TNF-ct生成，降低CYP2E1、iNOS和NF-r．B表达，激活并上调PPARtz的表达，以及对肝细胞线粒体结构和功能的保护作用有关。