菥蓂的化学成分分离及其抗肿瘤和抑菌活性研究

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菥莫(Thlaspi arvense Linn),又称苦盖菜、遏蓝菜,为双子叶植物十字花科菥莫的全草,是陇南地区普遍食用的山野草。菥莫种子和全草含有黑芥子甙,水煎服能益气明目和治疗肾炎、腰痛等[1]。本文采用95%的乙醇加热回流萃取,溶液浓缩至浸膏,加入适量的1%的稀盐酸溶解,静置48h,减压抽滤除杂质,石油醚萃取至无色,得到菥莫粗提液,分别采用不同pH和不同极性溶剂萃取法进一步分离菥莫粗提物。1.不同pH值萃取菥蓂提取液取适量菥莫粗提液,滴加浓氨水,同时用pH计检测,至菥蓂提取液pH3时,采用氯仿萃取至无色;再次滴加浓氨水至菥蓂提取液pH4时,采用氯仿萃取至无色,依次类推,至菥莫提取液pH9为止,共得到7个部位。采用硅胶柱分离pH3部位,洗脱剂用石油醚:乙酸乙酯(1:1)(流份1-2)、乙酸乙酯:石油醚(4:1)(流份3-4)、乙酸乙酯(流份5)、乙酸乙酯:甲醇(4:1)(流份6-7)、乙酸乙酯:甲醇(3:2)(流份8)和甲醇(流份9-12)六个梯度洗脱,然后采用高效液相色谱(HPLC)分析各流份和半制备型高效液相色谱(EPLC)分离3、4和6流份,得到4个化合物,依次为去氢吐叶醇(1)、吐叶醇(2)、异莨菪亭(3)和留兰香木酯素B(4),该4个化合物均为首次从菥蓂中分离得到。2.不同极性溶剂萃取菥莫提取液取适量菥莫提取液,滴加浓氨水,至溶液pH9-10,依次采用石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷和正丁醇萃取,共得到4个部位,硅胶柱分离乙酸乙酯部位,洗脱剂用三氯甲烷(流份1-3)、三氯甲烷:甲醇(20:1)(流份4-22)、三氯甲烷:甲醇(10:1)(流份23-32)、三氯甲烷:甲醇(4:1)(流份33-40)、三氯甲烷:甲醇(3:2)(流份41-45)和甲醇(流份46-48)六个梯度洗脱,然后采用高效液相色谱(HPLC)分析各流份和半制备型高效液相色谱(EPLC)分离8、9、12、18和28流份,得到7个化合物,依次为川陈皮素(5)、蚱蜢酮(6)、dihydrodehydrodiconiferyl alcohol(7)、芹菜素(8)、木犀草素(9)、blumeol C glucoside(10)和芹菜素-7-O-fl-D-葡萄糖苷(11),此外,该部位同样分离得到吐叶醇和去氢吐叶醇两个化合物,其中化合物5-7和10-11均为首次从菥莫中分离得到。在本文中,共分离得到16个化合物,其中已确定结构的有11个化合物。黄酮类化合物有3个:川陈皮素(5)、木犀草素(8)和芹菜素(9);倍半萜类化合物有4个:去氢吐叶醇(1)、吐叶醇(2)、蚱蜢酮(6)和blumenol C glucoside(10);木脂素类化合物2个:留兰香木酯素B(4)和dihydrodehydrodiconiferyl alcohol(7);黄酮苷类化合物1个:芹菜素-7-0-,8-D-葡萄糖苷(11);香豆素类化合物1个:异莨菪亭(3)。体外抗肿瘤实验结果表明:pH各部位对HepG2、R-HepG2以及Hep3B都有一定的增殖抑制作用,化合物川陈皮素(5)、芹菜素(8)和木犀草素(9)在50μM时对HepG2、R-HepG2以及Hep3B都有较强的抑制作用。抑菌实验结果表明:pH3部位对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌有抑菌活性,乙酸乙酯部位和二氯甲烷部位对大肠杆菌有抑菌活性。
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