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在全球范围内,每年近百万人死于恶性肿瘤。肺癌在发病率和致死率上都处在各类恶性肿瘤的前列,因此当前生物界及医学界都针对肺癌做了大量相关研究,虽有一定程度的成果,但还没有革命性的进展来突破研究瓶颈,仍需要用大量的研究和精力去探索其机理及机制。近年来,随着中药提取物的诸多药效被进一步揭示,中药提取物在癌症治疗中的作用越来越受到重视,在查阅了大量参考文献后,我们观察到金雀花碱因其独特的四环喹诺里西丁结构而具有较强的抗癌活性,但是其对肺癌的作用及其机制并不明确,因此本实验以多种肺癌细胞为体外研究基础,并加以裸鼠小鼠为体内研究对象,探索金雀花碱是否对肺癌具有的抗癌活性及其发挥作用分子机制,以期通过本文的研究,初步为金雀花碱乃至喹诺里西丁结构的生物碱在抗癌中的应用提供理论基础,更好的推进肺癌的医疗研究及发展。本实验首先利用CCK-8实验在细胞水平上检测金雀花碱对肺癌是否具有抗癌活性,检测了不同浓度金雀花碱处理后的肺癌细胞的存活率;利用双染法镜检及流式细胞术技术验证金雀花碱是否能够诱导肺癌细胞发生凋亡;利用流式细胞术检测金雀花碱处理不同时间后细胞周期变化;利用流式细胞术检测金雀花碱处理不同时间后细胞中活性氧水平的变化;通过Western blot检测凋亡、周期及通路相关蛋白的变化情况;通过构建裸鼠移植瘤模型检测金雀花碱对体内肿瘤的抑制情况。金雀花碱对体外生长的肺癌细胞系产生抗癌作用,增殖抑制的效果跟处理的浓度呈正比,对肺癌细胞产生的增殖抑制作用优于同浓度的阳性对照5-FU和顺铂,相比存在显著性差异。此外,在毒副作用的验证中,金雀花碱所具有的副作用更小,差异具有统计学意义;金雀花碱为IC50值的处理浓度条件下,细胞中线粒体膜电位降低,膜通透性增加,Bad、Cyt-c、cleaved-Caspase-3高表达,Bcl-2低表达,A549细胞发生线粒体依赖性凋亡;在金雀花碱为IC50值的处理浓度条件下,上调A549细胞中的活性氧水平,抑制AKT信号通路的过度激活,导致CyclinB1和CDK1/2的表达受阻,p27和p21呈现高表达,从而导致细胞周期停滞在G2/M期;在金雀花碱为IC50浓度的条件下,对A549细胞中活性氧含量上调,调控MAPK/STAT3/NF-KB通路蛋白的表达,再激活下游凋亡蛋白,导致细胞发生线粒体依赖性凋亡。金雀花碱能够抑制裸鼠移植瘤小鼠体内的肿瘤生长,对体内肿瘤的抵抗作用强于对照药物5-FU。金雀花碱处理肺癌细胞后上调细胞内活性氧的水平,调控MAPK/STAT3/NF-KB通路来直接诱导细胞凋亡;还可以调控AKT信号通路来调控细胞周期,进而发挥抗癌作用。