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背景 自上个世纪80年代以来，我国学者先后发现全反式维甲酸（ATRA）和三氧化二砷（As2O3）能诱导急性早幼粒细胞白血病（APL）细胞分化和凋亡，极大地提高了APL的完全缓解（CR）率，但是取得CR后，单用ATRA维持治疗，大部分患者会出现复发和复发后耐药现象。因此，对耐药机制及逆转耐药的研究成为又一重要课题，同时亟待开发新的高效低毒的诱导分化剂。丹参酮ⅡA（tanshinone，TanⅡA）是活血化瘀中药丹参的乙醚提取物，为主要的脂溶性有效成分。最近有研究显示，TanⅡA能诱导耐维甲酸（RA）的人APL细胞株MR-2的分化与凋亡，但机制不清。 目的 为研究TanⅡA对MR-2细胞的诱导分化作用，并探讨其可能的作用机制，为今后TanⅡA用于临床提供理论依据及实验基础。 方法 以0.5μg／ml TanⅡA处理NB4细胞作为阳性对照，观察1.0μg／mlTanⅡA处理MR-2细胞4天时的生长状况、形态学、四氮唑蓝（NBT）还原能力，并采用流式细胞术（FCM）检测细胞表面分化抗原(CD33、CD11b)、细胞周期分布、癌基因编码蛋白（P53、c-Fos、Bcl-2、c-Myc）等。 结果 1.0μg／ml TanⅡA能明显抑制MR-2细胞生长（P＜0.01），生长抑制率为73.5％，0.5μg／ml TanⅡA能抑制NB4细胞生长（P＜0.01），抑制率为67.7％，TanⅡA对两者的抑制作用无统计学差异（P＞0.05）。经TanⅡA处理后，MR-2、NB4细胞形态趋于成熟粒细胞，表现为细胞体积变小，核浆比例缩小，染色质变粗糙，核仁消失，胞浆内嗜苯胺蓝颗粒消失，核形态不规则，可见晚幼粒细胞，且TanⅡA处理NB4细胞后可见杆状核粒细胞。NBT还原实验显示，TanⅡA处理MR-2、NB4组阳性率分别为95.3％±0.76％和93.2％±1.04％，而相应空白对照组分别为3.5％±1.32％和2.8％±0.29％，处理组高于对照组（P＜0.01），两处理组间无统计学差异。FCM检测细胞表面分化抗天津医科大学硕卜研究生学位论文原，结果显示Tan IIA处理MR一2、NB4细胞后CD33阳性率下降，而CD】，b阳性率升高。处理后的细胞GO/G:期比例增高，S期细胞降低，细胞增殖指数下降（P<0.01）;对GZM期细胞无改变（P>.05），凋亡细胞数亦无统计学差异（P>.05）;抑癌基因p53、c一fos表达升高，而原癌基因bel一2、c一myc的表达下降（P<0.01）。 结论1.1.0。留ml TanllA能抑制MR一2粒系成熟阶段分化，诱导分化效果与0.5、留ml化的效果相当。细胞增殖，诱导MR一2细胞向 的丁hnnA诱导NB4细胞分TanllA可能通过调控表达，使细胞受阻于GO/G!期，减少S制细胞生长，诱导分化。MR一2细胞与增殖、分化有关的癌基因期细胞数目，抑制DNA合成，从而抑 3.TanllA对MR一2的最适作用浓度（l .0。留ml）高于对NB4的最适作用浓度（0 .5 09/ml），提示耐药的APL细胞株可能存在对TanllA的浓度依赖性。 4厂几nHA对耐药的APL细胞株MR一2的诱导分化作用，也提示尹ran HA可能通过某种机制逆转耐药。 5.TanllA用于临床治疗APL患者，特别是复发与耐药者可能有广阔的前景。