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人乙醇脱氢酶（alcohol dehydrogenase，ADH，EC 1.1.1.1）是含锌原子NAD依赖的胞质二聚体酶，能可逆氧化各种醇为相应的醛酮，是乙醇代谢的关键酶。它可分成五大类，共七个基因，具有基因多态性、种族特异性、性别特异性、组织特异性和时间特异性。目前对其动力学性质、结构和功能的研究较多，但整个乙醇脱氢酶体系作用的机制还不清楚。小量摄取酒精对身体有益，但过度饮用却会引起酒精敏感性反应（表现为脸红、心博加快、血压下降、头晕、恶心、呕吐等），甚至导致器官病变（如肝硬化、上下消化道癌、心脏病等）。随着酒销售量的增加，人们对解酒保肝类物质的需求日益迫切。人ADH制成的保健品在来源上比同类产品更具优势，基本没有副作用，用它来研制解酒药将会是一项重要的应用和未来发展的趋势。在人乙醇脱氢酶中，ADH1B2同工酶的活性最高，它的基因工程研究有重要的经济价值和社会价值。本文以人肝脏总RNA为模板，RT-PCR扩增得到ADH1B2基因，克隆到pUCm-T载体。再利用引物上的酶切位点，把ADH1B2基因重组到原核表达载体pProEX HTb中，构建成pProEX-ADH1B2质粒。ADH1B2基因与6×His的编码序列在大肠杆菌BL21（DE3）中进行融合表达。在最佳表达条件37℃、0.5 mM IPTG浓度、诱导表达7h后，ADH1B2融合蛋白以包涵体的形式高效表达，其外源基因表达量占全菌蛋白的58％，刷新了原核表达ADH1B2高产的新记录。二次洗涤包涵体，可以获得纯度较高的目的蛋白，这为工业化生产提供了条件。利用6×His标签，Ni2+亲和层析，可获得超高纯度的目的蛋白。亲和层析结果表明，当咪唑浓度达到60 mmol／L时，目的蛋白开始流出，到达100 mmol／L时有最大的洗脱峰。纯化后的蛋白经含有精氨酸的变性溶液透析复性后，监测A340的变化，结果表明复性蛋白具有ADH活性，比活力达到954 U／mg蛋白。这是我国首次用原核表达载体pProEX HTb获得ADH1B2。