P311及其相互作用蛋白对肺泡发育的影响初探

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肺泡是肺组织进行气体交换的基本功能单位,其发育质量直接影响着机体对氧的获取,了解其发生发育及调节机制将有望为一些肺泡发育不良或损伤性疾病的治疗提供方向。哺乳动物肺泡发育主要发生在胚胎发育后期和初生期,P311是我们利用抑制性差减杂交技术克隆的在肺泡发生相关阶段特异表达的基因。为了进一步明确其在肺泡发育中的功能,实验室前期利用酵母双杂交系统,从小鼠肺组织中筛选出了七个P311结合蛋白,其中Loxl-1、SPARC、Gal-1的已知功能与(肺)组织发育相关。在此基础上,本文首先利用双重免疫组织化学染色技术检测了P311在小鼠肺组织内表达的细胞定位及与其结合蛋白的共定位情况,发现P311主要表达于肌成纤维细胞及Ⅰ型和Ⅱ型肺泡上皮细胞中;Loxl-1、SPARC、Gal-1与P311在小鼠肺组织中均存在共定位,特别是Gal-1与P311广泛共定位于隔壁顶端或次级隔壁潜在发生处,提示它们可能在次级隔壁的发生和生长中起作用。由于肺泡的发生出现在肺组织形成的特定时期,我们随后分别检测了P311和Gal-1在肺组织中的表达时序性,发现二者在mRNA和蛋白水平的表达时序性都极其相似,均在小鼠肺组织发育的原始肺泡期(胚胎期18.5天,E18.5)表达开始上调,到肺泡期(出生后11天,P11)达到高峰,之后开始下降,至成熟期(出生后30天,P30)表达量大大降低。进一步研究显示,过表达P311和Gal-1均可促进A549细胞迁移;P311可促进A549细胞从G1期向S期转化,Gal-1基本不影响细胞增殖,但Gal-1对P311的促增殖效应表现出抑制作用。结果提示肺泡发育过程中Gal-1与P311可能通过促进肌成纤维细胞迁移,同时控制其增殖,最终影响次级隔壁发生或生长。  
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