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Cdc2激酶，是第一个在酵母中被发现的周期蛋白依赖性激酶，又称为Cdkl激酶。Cdc2激酶作为催化亚单位与调节亚单位cyclinB组成促成熟因子MPF，既可诱导卵母细胞减数分裂的成熟，又可促进细胞周期从G2向M期的转换。为了解甲壳动物卵母细胞减数分裂成熟过程中Cdc2激酶的分子机制，第一章以中华绒螯蟹Eriocheir sinensis作为实验动物，分离了编码Cdc2激酶的cDNA全长序列，并在mRNA和蛋白水平对该基因进行了时空表达谱分析。根据Genbank中已报道的其它动物的Cde2 激酶具有较高保守性的核苷酸序列设计简并引物，通过简并Rr-PCR的方法，首先获得Cdc2激酶约600bp的部分cDNA序列。根据该部分序列设计Cde2基因特异引物，用RACE扩增获得1364bp的Cdc2激酶全长cDNA序列。该序列编码299个氨基酸，蛋白分子量约为34.74kDa。该序列与Genbank数据库中已报道的其它物种的Cdc2激酶的氨基酸序列具有70％～76％的同源性，并且具有Cdc2激酶的特征位点，包括PSTAIR区域和Thr14、Tvrl5和Tha161磷酸化位点。普通RT-PCR和免疫印迹检测Cdc2 mRNA和蛋白在精巢、卵巢和心脏中表达，在肌肉、肝脏和鳃中无表达，并且在卵巢中表达量相对较大。半定量RT-PCR分析发现，Cdc2激酶在卵巢不同发育期mRNA的表达量相对稳定。免疫印迹方法发现Cdc2激酶的蛋白在卵巢发育不同时期(不成熟期和成熟期)都有表达，并且有两种亚型的Cdc2蛋白。最后免疫组化显示Cdc2蛋白在卵黄发生前期时主要分布于卵母细胞的细胞质，在卵黄发生期主要分布于细胞核，当卵母细胞发生GVBD后，Cdc2蛋白最终与纺锤体结合。该研究表明，Cdc2激酶并没有在转录水平调控河蟹卵巢的成熟，在蛋白水平，Cdc2在卵黄发生期和成熟期都有表达。而它与纺锤体的结合充分说明了Cdc2在细胞中定位的改变促进了河蟹卵母细胞减数分裂的成熟。
Cdk2激酶为周期蛋白依赖性激酶家族第二个被发现的成员，对细胞周期进程的控制同样具有关键作用，主要控制真核细胞Gl/S期的转换。偶然地，用第一章中分离河蟹Cdk1激酶cDNA序列的简并引物，在第二章中从罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)卵巢中分离了编码Cdk2激酶的cDNA全长序列。首先，同样通过简并RT-PCR的方法分离了约600bp的编码Cdk2激酶的cDNA片段，根据Cdk2激酶的cDNA 部分序列设计基因特异引物，RACE扩增获得1745bp的Cdk2激酶全长cDNA序列。该序列编码305个氨基酸，蛋白分子量约为35.099kDa。该序列与Genbank数据库中已报道的其它物种的Cdk2激酶的氨基酸序列具有65％～68％的同源性。而通过与其它动物Cdk1和Cdk2的氨基酸序列比对发现，虾的Cdk2激酶的PSTAIR区域有三个位点的突变。Thr14、Tyrl5和Thrl6l磷酸化位点仍然保守。普通RT-PCR检测Cdk2激酶的mKNA在虾的精巢、卵巢、心脏、肌肉、肝脏和鳃中都有表达，并且在精巢、卵巢、心脏和肝脏中表达量相对较大。该研究为甲壳动物卵母细胞发育成熟过程中，Cdk2激酶所起的作用奠定初步的分子基础。通过分析其氨基酸序列特征，为在蛋白水平进一步对甲壳动物Cdk2激酶进行分析，诸如特异性抗体的制作等奠定了理论基础。此外本文还构建了罗氏沼虾促雄腺cDNA文库并对该库做了部分表达序列标签的筛选和测序，为进一步筛选与罗氏沼虾促雄腺分化和发育调控相关的功能基因奠定了基础。