论文部分内容阅读
第一部分 大鼠全脑缺血预处理及缺血-再灌注模型的复制 目的：复制大鼠全脑缺血预处理及缺血-再灌注模型，观察脑缺血预处理对其后缺血-再灌注损伤的保护。方法：48只SD大鼠随机分成2组：实验组（缺血预处理组）和假手术组，采用改良的四血管夹闭法建立大鼠全脑缺血预处理及缺血-再灌注模型。实验组大鼠行全脑3min缺血预处理，假手术组给予假手术。术后不同时间点均行损伤性全脑6min缺血，再灌注24h，检测脑水含量和组织学改变。结果：实验鼠全脑缺血预处理后24h+缺血-再灌注组脑水含量和组织学损害均低于假手术组。结论：大鼠全脑缺血预处理对其后24h的损伤性全脑缺血-再灌注有保护作用。 第二部分 Mipu1在大鼠脑缺血预处理后的表达 目的：探讨全脑缺血预处理后不同时间点鼠脑皮质、海马Mipu1基因的表达。方法：24只SD大鼠随机分成2组：实验组（缺血预处理组）、假手术组。实验组大鼠行全脑3min缺血预处理，假手术组给予假手术。采用Northern杂交检测Mipu1在大鼠海马和前皮质在术后不同时间点的表达情况。结果：实验鼠全脑缺血预处理后12h组、24h组海马和前皮质Mipu1表达均高于假手术组。结论：大鼠短暂非损伤性3min缺血再灌注12、24h后脑Mipu1表达增高。 第三部分 Mipu1蛋白在神经胶质细胞中的亚细胞定位 目的：观察Mipu1蛋白在神经胶质细胞中的亚细胞定位。方法：通过加端PCR扩增1.8kb的Mipu1开放阅读框，并插入绿色荧光蛋白编码区的5’末端，构建Mipu1与绿色荧光蛋白GFP的融合表达质粒，并通过脂质体将重组质粒导入U-251神经胶质瘤细胞中，通过荧光显微镜观察Mipu1蛋白在正常和H2O2刺激时的亚细胞分布。结果： 成功构建了Mipu1与GFP的融合表达质粒Mipul-pEGFP—N1，并观察到Mipu1蛋白在正常和H2O2刺激时均定位于细胞核内。结论：Mipu1为