长链非编码RNA RP11-452H21.4在胰腺癌细胞中的功能研究

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目的:探讨沉默、过表达长链非编码RNA RP11-452H21.4对胰腺癌细胞恶性表型的影响,为阐明胰腺癌作用机制奠定基础。方法:通过构建针对长链非编码RNA RP11-452H21.4的Smart Silencer和真核表达载体pcDNA3.1,转染胰腺癌细胞株Panc-1,采用逆转录PCR鉴定敲低及过表达效果,并对胰腺癌细胞株Panc-1进行以下细胞功能实验:(1)CCK-8法检测胰腺癌细胞株Panc-1增殖能力的变化;(2)Transwell迁移实验检测胰腺癌细胞株Panc-1迁移能力的变化;(3)Transwell侵袭实验检测胰腺癌细胞株Panc-1侵袭能力的变化。结果:(1)逆转录PCR实验示:胰腺癌细胞株Panc-1长链非编码RNA RP11-452H21.4的敲低和过表达效果明显。(2)CCK-8增殖实验示:长链非编码RNA RP11-452H21.4敲低组与对照组胰腺癌细胞株Panc-1的OD450在24h、48h无明显差异,而在72h、96h长链非编码RNA RP11-452H21.4敲低组胰腺癌细胞株Panc-1的OD450明显高于对照组,且差异具有统计学意义(2.16±0.20 Vs 1.59±0.15,P=0.017;2.62±0.20 Vs 1.99±0.12,P=0.021);长链非编码RNA RP11-452H21.4高表达组与空载质粒组胰腺癌细胞株Panc-1的OD450在24h、48h无明显差异,而在72h、96h长链非编码RNA RP11-452H21.4高表达组胰腺癌细胞株Panc-1的增殖率明显低于空载质粒组,且差异具有统计学意义(1.23±0.07 Vs 1.57±0.11,P=0.009;1.46±0.17 Vs 1.89±0.17,P=0.035)。(3)Transwell迁移实验示:长链非编码RNA RP11-452H21.4敲低组敲胰腺癌细胞株Panc-1穿膜细胞个数明显高于对照组,差异具有统计学意义(180.33±17.17 Vs 79.67±8.80,P=0.002);长链非编码RNA RP11-452H21.4高表达组胰腺癌细胞株Panc-1穿膜细胞个数明显低于空载质粒组,差异具有统计学意义(61.33±10.96 Vs 91.33±10.50,P=0.049)。(4)Transwell侵袭实验示:长链非编码RNA RP11-452H21.4敲低组敲胰腺癌细胞株Panc-1穿膜细胞个数明显高于对照组,差异具有统计学意义(130.33±13.07 Vs 85.67±10.96,P=0.021);长链非编码RNA RP11-452H21.4高表达组胰腺癌细胞株Panc-1穿膜细胞个数明显低于空载质粒组,差异具有统计学意义(35.67±8.96 Vs 83.00±10.20,P=0.008)。结论:(1)下调长链非编码RNA RP11-452H21.4在胰腺癌细胞株Panc-1的表达,细胞增殖、迁移及侵袭能力均上升;上调长链非编码RNA RP11-452H21.4在胰腺癌细胞株Panc-1的表达,细胞增殖、迁移及侵袭能力均下降;(2)长链非编码RNA RP11-452H21.4能抑制胰腺癌细胞株Panc-1的增殖、迁移及侵袭能力。
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