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目的探讨超声微泡造影剂(Sonovue)在诊断超声辐射下,不同剂量、不同成像模式下对兔睾丸急性单侧完全扭转复位后的影响和相关机制。方法70只成年健康大白兔随机分成10个小组,每组7只,缺血复灌后即刻取材组(S1、A1、B1、C1、D1);24h取材组(S2、A2、B2、C2、D2)。选择左侧睾丸进行完全结扎手术,完全阻断动静脉血流3h,达到缺血时间后解除结扎,S1、S2为直接复灌无造影剂组,A1、A2为小剂量(0.1ml/kg)常规造影剂组,B1、B2为大剂量(1ml/kg)常规造影剂组,C1、C2为小剂量(0.1ml/kg)造影剂爆破组,D1、D2为大剂量(1ml/kg)造影剂爆破组。各组术前、复灌后及24h取材组取材前分别进行双侧睾丸超声造影,分析各组造影参数:到达时间(AT)、速度参数(β)、峰值时间(TTP)、峰值基础强度差(PBD)、峰值减半时间(DT/2)的变化。再灌注后,即刻取材组即刻取材,24h取材组经标准饲养1天后切除术侧睾丸。观察睾丸的大体标本,组织切片光镜下病理变化(HE染色),进行Johnsen’s评分,电镜下观察超微结构变化,检测睾丸组织MDA含量及SOD活性,Western blot检测睾丸生精上皮细胞中Caspase-3、Bax的表达情况,Tunel法检测细胞凋亡指数(AI),并对各组进行对比研究。结果1.术前各组术侧睾丸超声造影参数组间无显著差别(P>0.05)。解除结扎后即刻常规造影组中大剂量及小剂量的超声造影结果显示造影参数β、TTP均无显著的差别(p>0.05),大剂量组AT缩短、DT/2显著延长(p<0.05),PBD显著的增高(p<0.05)。24h取材组中D2组TTP及DT/2较其他组显著延长(P>0.05),PBD显著下降P>0.05),时间强度曲线上表现为“峰值较低且后移”。2.24h取材组SOD含量较即刻取材组明显降低,MDA含量明显升高((P<0.05)。C2组SOD较S2组轻微降低,MDA轻微升高但差值无统计学差别(P>0.05),D2组的SOD较其他组显著降低,MDA升高(P<0.05)。3.镜下,即刻取材组间Johnsen’s评分无明显差别(P>0.05)。复灌后24h取材组中,各组术侧睾丸的Johnsen’s评分均低于即刻取材组,A2、B2、C2组术侧睾丸Johnsen’s评分较S2组无差别(P>0.05),但显著低于D2组(P<0.05)。S1、A1、B1组术侧睾丸间质可见部分小血管轻度的扩张,未见明显的出血、血栓形成。而C1、D1组可见血管扩张,淤血,部分小血管内可见血栓形成。光镜和电镜下生精细胞出现严重的分化成熟障碍。4.Tunel凋亡指数和Western blot检测显示,缺血复灌后即刻取材各小组间生精细胞凋亡差别无显著意义(P>0.05),复灌后24h各小组凋亡指数(AI)和促凋亡蛋白较即刻取材组明显升高(P<0.05)。C2组AI,Bax和caspase-3较S2、A2、B2组轻微上调,但差别无显著性意义(P>0.05)。D2组较其他各组AI,Bax和caspase-3显著上调(P<0.05)。结论1.彩色多普勒超声可对急性睾丸完全扭转做出准确的诊断,超声造影时间-强度曲线(TIC)可间接反应复位后睾丸内微循环状态,指导下一步的治疗;2在诊断超声辐射下,常规造影和小剂量造影剂爆破时并未增加缺血睾丸的损伤,但大剂量超声造影剂爆破成像时可加重缺血睾丸的损伤;3.在体研究中,微泡增强的声空化主要作用于微血管壁,引起微循环障碍导致实质细胞损伤。相关机制可能为空化作用引起微血管损伤,加重了睾丸的进一步缺血、缺氧。通过增加氧化应激反应,募集大量的中性粒细胞浸润及上调促凋亡蛋白等加重缺血睾丸的损伤。