烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)是世界性重大外来入侵害虫之一,每年因烟粉虱的危害给我国农业生产造成了巨大的经济损失,在我国危害最为严重的为B型和Q型烟粉虱。由于杀虫剂的广泛使用,烟粉虱对很多杀虫剂产生了抗药性。研究证明Q型烟粉虱对杀虫剂的抗药性显著强于B型烟粉虱,导致近年来Q型烟粉虱逐渐取代了B型烟粉虱成为优势种群。本研究选用新烟碱类杀虫剂噻虫啉药剂诱导,利用实时荧光定量PCR分析,找出与抗噻虫啉药剂相关的抗性基因,最后应用RNAi技术验证抗性基因的功能,为烟粉虱的抗药性防治和治理提供了重要的理论基础。根据转录组数据信息选取细胞色素P450 CYP6 CX和DW两个亚家族基因成员作为候选基因,筛选出12对CX、DW家族基因的定量引物。选择对烟粉虱高效的新烟碱类杀虫剂噻虫啉对B、Q型烟粉虱进行毒力测定。B、Q型烟粉虱在各个药剂浓度梯度条件下的死亡率结果表明,Q型烟粉虱的抗药性显著强于B型烟粉虱,实验结果与现有研究结果一致。利用实时荧光定量PCR分析未经药剂处理的B、Q型烟粉虱候选基因表达量差异,发现大部分基因在Q型烟粉虱的表达量高于B型烟粉虱。然后用噻虫啉药剂处理,定量分析处理后候选基因的表达量变化,结果表明CX5、CX6、CX7以及DW2基因在药剂处理后都不同程度上调表达。其中CX5、CX7基因的表达量与药剂浓度呈现出一定程度的正相关,说明其在烟粉虱的抗药性中发挥了重要作用。根据前期实验结果选择表达量差异显著的CX5基因作为RNAi的目的基因,利用饲喂法成功沉默了烟粉虱CX5基因。并用噻虫啉药剂处理干扰掉目的基因后的B、Q型烟粉虱,分别统计B、Q型烟粉虱的死亡率。结果表明,干扰掉目的基因的烟粉虱死亡率高于对照组烟粉虱的死亡率,说明烟粉虱CX5基因对噻虫啉的抗性中发挥了重要作用。