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目的:探讨Aurora激酶抑制剂VX-680与顺铂(CDDP)联合作用对食管癌细胞株EC9706增殖、凋亡、粘附、迁移以及血管生成的影响及分子机制。方法:1.VX-680与顺铂单独应用及联合应用对人食管癌细胞EC9706增殖、凋亡、粘附、迁移及小管生成的影响;食管癌细胞EC9706细胞分别经不同浓度的VX-680、CDDP、VX-680+CDDP作用48h,采用倒置显微镜观察细胞的形态学变化。采用MTT法检测细胞活力的改变并采用Chou-Talalay法计算两药联合指数(Conbinaton index,CI);采用DAPI染色法检测细胞凋亡的改变;采用细胞间和细胞外粘附实验来检测细胞粘附能力的变化;采用划痕实验来检测细胞迁移能力,采用小管生成实验检测对细胞的小管形成的影响。2.VX-680与顺铂单独应用及联合应用对人食管癌细胞EC9706凋亡、粘附、迁移以及血管生成相关蛋白的影响;食管癌细胞EC9706经VX-680、CDDP、VX-680+CDDP作用48h后,采用Western blot检测凋亡蛋白PARP和Caspase-3、粘附分子E-cadherin、影响迁移的蛋白分子MMP-2,以及血管生成相关因子VEGF的表达情况。3.VX-680与顺铂单独应用及联合应用后对信号分子的影响;食管癌细胞EC9706经VX-680,CDDP,VX-680+CDDP作用48h后,采Western blot检测信号通路相关蛋白ERK/p-ERK、AKT/p-AKT的表达水平。结果:1.VX-680+CDDP处理组中食管癌细胞EC9706大量漂浮,少量贴壁,细胞增殖的抑制率为(68%±0.14%),而单药组抑制率分别为(45%±0.02%)、(16%±0.04%),且两药为协同作用关系;DAPI染色法显示,与单药组相比,细胞发生核浓缩、核碎裂的比例明显增加(P<0.05);细胞间粘附实验显示,VX-680+CDDP处理组比单药组细胞聚集形成的团块更大,更紧密(P<0.01);细胞间离散程度更弱;细胞-细胞外基质粘附实验显示,VX-680+CDDP处理组比单药组的细胞与三种不同的外基质的粘附能力更加减弱的(P<0.05);划痕实验结果显示,VX-680+CDDP处理组比单药组细胞愈合能力更强(P<0.001);小管形成实验结果显示,VX-680+CDDP处理组比单药组HUVEC细胞的小管形成数减少(P<0.001)。2.食管癌细胞EC9706经VX-680、CDDP、VX-680+CDDP处理48h后,与对照组及单药组相比,凋亡相关蛋白Caspase-3酶原和PARP原带的表达水平明显降低,procaspase-3、cleaved-PARP表达明显上调,粘附分子E-cadherin表达水平上调,转移相关分子MMP-2表达减弱,VEGF表达水平下调。3.Western blot结果显示:VX-680+CDDP处理组中,与对照组和单药组相比,ERK和AKT信号通路中p-ERK和p-AKT的表达水平下调,而总蛋白ERK和AKT并未有明显变化。结论:1.VX-680与顺铂联合应用,可以明显抑制食管癌细胞的增殖、促进凋亡、抑制迁移、增强细胞-细胞间的粘附能力、减弱细胞与细胞外基质的粘附能力、减弱HUVEC的血管生成能力。2.VX-680与顺铂联合应用能够激活Caspase-3和PARP蛋白,进而来促进食管癌EC9706的凋亡;VX-680与顺铂的联合应用通过增强E-cadherin的表达来增加细胞间的同质粘附能力、降低细胞-细胞外基质的粘附力。通过下调食管癌EC9706细胞中MMP-2和VEGF的表达来从而减弱EC9706细胞的迁移能力以及HUVEC细胞的血管生成能力。3.VX-680与顺铂联合应用可能通过AKT,ERK信号通路从而影响食管癌EC9706细胞的恶性表型。