【摘 要】
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目的:本实验以宫颈癌Hela细胞为研究对象,分析天花粉蛋白（TCS）对Hela细胞中miR-1290表达?继而对Hela细胞EMT的影响。方法:（1）实时定量PCR技术验证TCS对miR-1290表达的影响是否与芯片结果一致;（2）Transwell技术用于检测miR-1290表达对宫颈癌Hela细胞迁移和侵袭能力的影响;（3）Western blot检测miR-1290对上皮间质转化（EMT）相
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目的:本实验以宫颈癌Hela细胞为研究对象,分析天花粉蛋白（TCS）对Hela细胞中miR-1290表达?继而对Hela细胞EMT的影响。方法:（1）实时定量PCR技术验证TCS对miR-1290表达的影响是否与芯片结果一致;（2）Transwell技术用于检测miR-1290表达对宫颈癌Hela细胞迁移和侵袭能力的影响;（3）Western blot检测miR-1290对上皮间质转化（EMT）相关标志蛋白Vimentin的影响;（4）用miRanda?miRTar Base?miRDB等靶基因预测数据库对miR-1290的靶基因进行预测并取交集后,选取RANBP9作为进一步研究对象;（5）用荧光素酶报告基因分析法验证软件预测的miR-1290的结合位点;（6）Western blot?实时定量PCR检测miR-1290对RANBP9表达水平的影响。结果:（1）实时定量PCR验证了miR-1290表达下降与芯片结果一致;（2）Transwell实验结果显示miR-1290可以促进Hela细胞发生迁移?侵袭;（3）蛋白水平的额分析发现miR-1290能促进Vimentin的表达;（4）荧光素酶报告分析结果显示RANBP9的3’UTR内含有miR-1290靶向结合位点;（5）从m RNA和蛋白水平上证实RANBP9为miR-1290的下游靶基因。结论:天花粉蛋白处理Hela细胞能下调miR-1290的表达,并通miR-1290/RANBP9通路来抑制宫颈癌上皮间质转化作用。
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