瘤胃源酵母的分离、筛选及其对山羊瘤胃发酵的影响

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酵母作为畜牧生产中一类重要的微生物添加剂,在反当动物生产中得到了广泛应用。为获得对反刍动物生产更有应用价值的酵母菌种,本论文从奶牛和山羊瘤胃液中分离到94株酵母菌,通过比对这些菌株的生长速率及其对乳酸的利用能力,最终筛选出1株性能良好的酵母菌株;而后运用体外批次培养技术,评估了添加此株菌对瘤胃微生物发酵不同底物的特性的影响;在此基础上,进一步研究了该酵母菌培养物对山羊瘤胃参数和饲料降解率的影响。论文分三部分进行。1瘤胃源酵母的分离筛选以及鉴定本实验拟分离筛选对乳酸利用能力强和生长速率快的瘤胃源酵母。实验分别以山羊及奶牛瘤胃液为菌源,利用酵母选择性培养基,通过分离筛选获得94株疑似酵母菌株。通过乳酸利用能力测定、生长曲线测定和26SrDNA鉴定试验,最终获得1株生长速度较快的疑似酵母菌株。26SrDNA序列分析表明,上述分离出的疑似酵母菌株为Meyerozyma属酵母菌株。结果表明,山羊及奶牛瘤胃液中存在多种酵母,并且这些酵母的乳酸利用能力和生长速度不一致,部分菌株具有较快的生长速度与较强的利用乳酸的能力。2菌株Y09对瘤胃微生物发酵不同底物能力的影响实验分别以羊草与精料混合物、马铃薯淀粉和玉米淀粉为底物,以奶牛瘤胃液为接种物,研究了上述酵母菌株对瘤胃微生物体外发酵参数的影响。结果表明,在以羊草和精料混合物为底物时,添加瘤胃源酵母显著降低了发酵液pH和乳酸浓度(P<0.001),显著提高了丙酸浓度和干物质消失率(P<0.05);以玉米淀粉为底物时,添加该酵母菌显著降低了发酵液pH和乳酸浓度(P<0.001);以马铃薯淀粉为底物时,显著降低了 pH(P<0.05),提高了丙酸浓度(P<0.05);但在上述三种底物条件下,添加酵母菌对发酵液中总产气量、氨态氮、乙酸、丁酸、异丁酸、戊酸和异戊酸浓度无显著影响(P>0.05)。Real-time PCR测定结果表明,添加该酵母菌可显著提高以羊草和马铃薯淀粉为底物时发酵液中总菌16S rDNA的挎贝数(P<0.05)。结果说明,本研究分离获取的瘤胃源酵母可提高瘤胃微生物对羊草精料混合物的降解能力,降低羊草精料混合物组和玉米淀粉组发酵液中乳酸浓度,提示该菌株可能具有提高日粮消化利用效率、促进丙酸生成和瘤胃细菌生长的作用。3添加Y09活性酵母对山羊瘤胃发酵与饲料消化率的影响本实验拟研究Y09活性酵母对山羊瘤胃发酵和饲料消化率的影响。实验选用瘤胃源酵母菌种Y09,采用固体发酵的方法制备酵母培养物(活菌数达5*108个/g),实验动物选取健康、体重相近的波杂山羊14头,随机分为两组,每组7头,处理组在基础日粮中添加10 g的活性酵母。结果表明,添加活性酵母显著降低了饲喂前0 h和饲喂后4 h瘤胃内乳酸浓度(P<0.05),提高了日粮粗蛋白消化率(P<0.05),但对山羊日增重、采食量、料重比和pH无显著影响(P>0.05),对瘤胃氨态氮和TVFA浓度、乙丙比、有机物消化率、粗脂肪消化率、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维消化率也无显著影响(P>0.05)。采用Real-Time PCR定量测定结果表明,添加活性酵母显著提高了饲喂前0 h和饲喂后4 h瘤胃内总菌16S rDNA的挎贝数。结果说明,日粮中添加Y09活性酵母有助于降低瘤胃内乳酸浓度和提高瘤胃细菌总数,可提高山羊对饲料粗蛋白的消化率,但对山羊生长性能及瘤胃发酵指标无显著影响。
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