合欢皮皂苷对猪伪狂犬病疫苗的佐剂活性及解毒作用

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lxm1230520
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
猪伪狂犬病(Pseudorabies)是由伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PrV)引起的多种家畜和野生动物以发热、奇痒及急性脑脊髓炎为主要症状的一种急性传染病。伪狂犬病病毒感染猪会引起种猪的繁殖障碍,妊娠母猪流产、产死胎、木乃伊胎等,15日龄内的仔猪死亡率达100%。伪狂犬病给全球养猪业造成了巨大的经济损失,为当前危害养猪业的重大传染病之一。疫苗是预防伪狂犬病发生和传播的主要有效措施。然而,目前临床上使用的猪伪狂犬病疫苗免疫保护率欠佳。添加佐剂是当前强化疫苗免疫效果不可或缺的手段。  AJS(Albizziajulibrissin saponin)系从中药传统合欢皮中筛选得到的佐剂活性皂苷有效部位,对卵清蛋白(OVA)、禽流感鸡痘病毒载体活疫苗和禽流感-新城疫重组二联活疫苗等均具有显著的佐剂作用,且溶血性小,安全性高,是一种理想的疫苗候选佐剂。同时,前期实验发现AJS可显著降低猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗对小鼠的毒性。本文评价了AJS对猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗的佐剂活性,并研究了AJS降低猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗对小鼠毒性的作用,为基于AJS佐剂的猪伪狂犬病疫苗研制与开发提供依据。  1.AJS对猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗的佐剂作用采用ICR小鼠,在摸索猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗免疫剂量的基础上,以铝胶(Alum)和Quil A为佐剂对照,猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗单独或联合不同剂量的AJS(25、50、100μg)皮下注射免疫小鼠二次,间隔2周,加强免疫后14天,取血,分离制备血清。采用IDEXX猪伪狂犬病病毒gB抗体检测试剂盒检测了免疫小鼠血清中猪伪狂犬病病毒gB抗体(PRV gB Ab)水平,以及间接ELISA方法分析猪伪狂犬病病毒gB特异性IgG总抗体及其亚类IgG1和IgG2b的水平,评价AJS对猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗的佐剂作用。结果表明:AJS可显著提高猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗免疫小鼠血清中PRV gB抗体水平,以及猪伪狂犬病病毒gB特异性IgG、IgG1、IgG2b抗体水平。说明AJS对猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗有显著的佐剂作用。这些结果为AJS作为猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗的佐剂进行临床实验和推广应用奠定了基础。  2.AJS对猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗的解毒作用采用AJS处理猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗、猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗单独或联合AJS免疫小鼠脑组织感染Vero细胞,通过观察细胞病变(CPE),研究了AJS对猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗引起小鼠毒性的影响。采用RT-PCR法检测AJS处理猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗感染Vero细胞、猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗单独或联合AJS免疫小鼠脑组织感染Vero细胞,以及猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗单独或联合AJS免疫小鼠脑组织中猪伪狂犬病病毒基因组DNA及毒力基因的表达变化。猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗免疫小鼠体内病毒定位分析结果显示:仅脑组织感染的Vero细胞发生典型的细胞病变,说明该病毒仅定位于免疫小鼠的脑组织。体内和离体实验结果表明,仅猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗单独免疫小鼠脑组织及其感染的Vero细胞检测到猪伪狂犬病病毒基因组DNA及毒力基因的表达。体外结果表明:在AJS对PrV的杀灭浓度范围内,AJS对猪伪狂犬病病毒感染Vero细胞gB、gD、gG等蛋白的表达无显著影响,但能显著降低毒力基因TK、pK、gI及gC的表达水平,且呈剂量依赖性。这些结果说明:AJS可通过下调猪伪狂犬病病毒毒力基因的mRNA表达,降低猪伪狂犬病病毒的毒力,从而发挥解毒作用。研究为AJS作为抗病毒药物开发及为基于AJS佐剂的猪伪狂犬病疫苗的研制与开发提供了依据。
其他文献
改革开放以来,住宅的建设一直是城乡建设的热点,住宅建设也从一开始对量的追求逐渐过渡到质的追求。特别是住房制度的改革使得人们对住宅的整体外观、使用功能、舒适度以及
本文从理论上探讨了冗余资源与企业社会责任之间的关系,并以福布斯慈善榜上榜房地产企业为例,验证冗余资源对企业慈善捐赠这一特殊的企业社会责任行为的影响作用,发现:冗余资
禽胚胎性疾病是一类由多种病原引起的综合性疾病,可造成鸡胚发育受阻,孵化率降低,死亡率升高等,给养禽业造成重大的经济损失,其中以传染性胚胎病危害最严重。禽波氏杆菌病(Bordete
几年来,随着改革的不断深化和市场经济的日益完善,京煤三厂进行了一系列产业结构调整工作: 成功开发运作美丽园小区项目,为进行产业结构调整完成了资金准备;投资兴建海博大酒
生产性服务业的迅速发展对于转变发展方式、调整经济结构意义深远。但生产性服务业的发展并非一帆风顺,抑制生产性服务业发展的因素有体制原因、市场化程度低和人才短缺等等
摘 要: 数学推动了科学技术的进步,在人类文明的发展中起着重要作用。高中数学作为基础教育学科,由于知识抽象、枯燥,成为令许多高中生头疼的学科。为了切实解决目前高中数学教学中的这一难题,本文建议教师用有效的、有针对性的提问营造良好、轻松的课堂环境,激发学生学习思考,调动学生的积极性,学好高中数学这门基础学科。从而培养出更多热爱科学、热衷数学的优秀人才,为我国经济建设和科学技术的发展作出贡献。  关键
复杂的事物以简单化方法处理,往往是图省事、吃大亏。企业承包本来是一项综合的系统工程,设想简单化,实行以利润为主的大包干,其结果必然是以一利掩多弊,难有好的效益。此乃
一、玉米空秆的原因 (一)营养不良。玉米是高产作物,吸肥力强,需肥量大。据测定,每生产100公斤玉米籽粒,需纯氮2.6公斤、纯磷0.9公斤、纯钾2.1公斤,三要素之比为1:0.35:0.81
我国古代教育家孔子说:“知之者不如好之者,好之者不如乐之者。”兴趣是最好的老师。在数学教学中,要想真正达到教学目的,就一定要培养学生的学习兴趣。学习动机是直接推动学生学习的一种内在动力,当学生对数学这门课产生浓厚的兴趣时,他们就会愿意学、主动学。现代心理学的研究表明,学习兴趣的高低直接影响学习效果的强弱。  一、渗透数学思想  科学愈发达,需要的数学知识就愈多。哪里有“形”,哪里就有“数”,哪里就
新的课程标准把德育教育放在十分重要的地位。新课程的培养目标指导我们,要使学生具有爱国主义、集体主义精神,热爱社会主义,形成社会主义民主法制意识,遵守国家法律和社会公德;逐步形成正确的世界观、人生观、价值观;具有社会主义责任感,努力为人民服务,使学生成为有理想、有道德、有文化、有纪律的一代新人。这充分说明了德育教育在整个教育教学中的重要地位,作为基础学科的数学也必须重视德育教育。那么怎样才能在高中数