近年来，随着冶金、仪表、印染等工业的发展，排出废水中重金属离子大幅度增加，除直接对海洋生物造成毒害外，重金属还会在河口浅海区沉积于淤泥中，对栖息于潮间带滩涂中的生物生存与生长带来不良的影响。可口革囊星虫（Phascolosoma esculenta Chen et Yeh）属底栖动物，其味道鲜美，含有丰富的蛋白质、多种氨基酸、微量元素和能够调节大脑功能的牛磺酸等，具有多种药理活性。可口革囊星虫在恶劣的环境中却能生长良好，这与其抗性很强，可抗低温、高温、缺氧和重金属等条件是密切相关的，故具有非常重要的研究价值。　　 本文以可口革囊星虫为研究对象，利用相关基因部分氨基酸序列设计兼并引物，通过RNA提取、反转录、cDNA末端快速扩增（RACE）等一系列分子生物学技术，克隆得到热休克蛋白70（HSP70）基因、铁蛋白（ferritin）基因、蚯蚓血红蛋白（hemerythrin）基因的全长序列。利用E.coli对这三种基因进行体外重组表达，为进一步在蛋白水平上研究其功能提供了条件。纯化蛋白后进行多克隆抗体的制备，Western blot检测多克隆抗体的特异性。得到如下实验结果：　　 首先，成功地从可口革囊星虫血液中获得热休克蛋白70基因的全长序列。该基因全长2520bp，5’-端非编码区为125bp，3’-非编码区为421bp，开放阅读框长度为1974bp，可编码658个氨基酸。经比对分析表现出极高的同源性。其理论蛋白质分子量为71.5947KD，理论等电点为5.15，经二级结构预测表明HSP70属于一种混合型蛋白，为抗原表位的确定提供了有力的证据。E.coli成功对其进行了体外重组表达，重组菌在相对分子质量在66.4KD与97.2KD之间可见明显的条带。Western blot结果表明重组表达的蛋白与鼠抗可口革囊星虫HSP70的多克隆抗体能特异性结合。　　 第二，可口革囊星虫铁蛋白基因全长1017bp，5’-端非编码区为151bp，3’-非编码区为341bp，开放阅读框长度为525bp，可编码175个氨基酸，与海星ferritin，刺参ferritin，仿刺参ferritin等的同源性较高。其理论蛋白质分子量为20.1955KD，理论等电点为5.08。经SDS-PAGE电泳分析，重组菌在相对分子质量在20.1KD与29.0KD之间可见明显的条带，而未经诱导菌株与空载体对照菌则无条带。纯化后制备多克隆抗体。　　 第三，可口革囊星虫蚯蚓血红蛋白的一亚基全长770bp，5’-端非编码区为83bp，3’-非编码区为327bp，开放阅读框长度为360bp，可编码120个氨基酸。从氨基酸序列来看，可口革囊星虫与库岛管体星虫的同源程度最高，与光裸方格星虫的同源程度次之。其理论蛋白质分子量为13.6294KD，理论等电点为5.78。经SDS-PAGE电泳分析，当IPTG终浓度为1mmol/L时，诱导4h时目的蛋白可以完全表达，重组菌在相对分子质量在14.3KD与20.1KD之间可见明显的条带。纯化后制备的多克隆抗体效果理想。