两头尖为毛莨科银莲花属多被银莲花(Anemone raddeana Regel)的干燥根茎。属于有毒中药,具有祛风湿,消痈肿等功效,常用于风寒湿痹,四肢拘挛,骨节疼痛,臃肿溃烂等症。文献显示,已从两头尖中分离出多种三萜皂苷类化合物,临床药理研究亦证明两头尖具有抗炎、抗肿瘤、抗惊厥、解热镇痛等作用。但是,两头尖药材质量控制标准方面的研究未见报道,以及对两头尖毒性的解析及相关的毒理研究未见详细的研究文献。为规范使用两头尖,保证临床的安全用药,及进一步开发此药材,也为其他毒性中药的研究提供借鉴。本文对两头尖的质量标准进行了系统的研究,对其毒性进行了初步的探索。选取产自中国东北部11个批次两头尖药材饮片。首先,采用薄层色谱法(TLC)进行定性分析,高效液相色谱法(HPLC)测定饮片中竹节香附素A的含量,检测药材饮片是否符合《药典》(2010版)的规定。其次,利用HPLC、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)及紫外光谱(UV)分别建立两头尖提取液的指纹图谱。在建立两头尖指纹图谱时,利用标准化法处理数据,以消除量纲的影响。以标准化后的数据计算样品向量与单位向量的夹角余弦相似度cosθ。同时,以样品与对照品含量的百分比为校正因子,校正夹角余弦相似度,得到的H具有定量意义。此法评价的指纹图谱兼具有定性定量的综合评价功能。以3种指纹图谱的cosθ和H值为指标,采用SAS统计软件对样品进行聚类分析。最后,制备两头尖水提浸膏,以石油醚、氯仿、乙酸乙酯及正丁醇分别分级萃取两头尖水提浸膏,采用SAS统计软件,以Bliss法计算两头尖水提浸膏的LD50(median lethal dose),并对两头尖进行毒性分级。测定乙酸乙酯提取部位的LD50,测定石油醚、氯仿及正丁醇提取部位的MTD (maximum tolerated dose)。定性实验结果显示,11批次两头尖样品的薄板在对照品竹节香附素A的相应位置显示斑点。含量测定结果显示,两头尖样品中竹节香附素A的含量均高于0.20%(按干燥品计),符合《药典》(2010版)规定。HPLC指纹图谱的色谱条件为：以乙腈及0.1%磷酸溶液为流动相,流动相洗脱梯度为：0-7min,乙腈47%；7-40min,乙腈47-80%,流速为1mL/min,检测波长206nm,理论板数按竹节香附素A峰计算应不低于4000。11批次两头尖样品共确定8个共有峰,传统夹角余弦相似度cosθ均在0.97以上,符合建立指纹图谱的要求。cosθ在0.115和0.951之间变化,H在0.045和1.129之间变化,表明cosθ和H可以更显著的区分样品。样品S9的cosθ和H值最低,分别为0.115和0.045；S3的值最高,分别为0.951和1.129。FT-IR指纹图谱,扫描范围为1500-800cm-1,样品S5的cosθ和H值最高,S8最低。UV指纹图谱,扫描范围为210-400nm,样品S6的cosθ和H值最高,S11最低。采用SAS统计软件对样品进行聚类分析,S4和S11首先被聚为一类；其次为S1和S6。S8与其它的样品距离最远。两头尖水提物小鼠灌胃毒性实验LD50及其95%可信限分别为104.50和95.45-115.29g生药/kg。按照Blach well法推算相当于10.45g/人,说明在临床应用常用量为1-3g一般是安全的。按照中药毒性分级,两头尖介于“中毒”和“小毒”之间。石油醚、氯仿和正丁醇萃取部位小鼠最大耐受量实验,灌胃给药1000g生药/kg,14天后小鼠未出现明显中毒症状,小鼠体重也无明显改变,与对照组比较无统计学差异。解剖后,肉眼观察其主要脏器,未发现明显异常,说明分别口服两头尖石油醚、氯仿和正丁醇萃取物1000g/kg,对小鼠都无明显急性毒性作用。乙酸乙酯萃取部位的LD50及95%的可信限分别为604.81和537.99-673.57g生药/kg。