目的:采用液态胶原为支架、分别以新生大鼠心室肌心肌细胞和胚胎干细胞来源的心肌细胞为种子细胞构建工程化的心肌组织。 内容:考察以液态胶原为支架构建工程化心肌组织细胞的接种密度和胶原用量对工程化心肌组织形成的影响,在此基础上建立从胚胎干细胞来源的心肌细胞构建工程化心肌组织的方法。 方法:采用胰酶消化法分离新生大鼠心室肌心肌细胞,建立起批量获得胚胎干细胞来源的心肌细胞的方法:采用旋转生物反应器批量扩增拟胚体、抗坏血酸诱导胚胎干细胞向心肌细胞分化并采用Percoll不连续密度梯度离心富集心肌细胞。在此这些实验的基础上,以液态胶原为支架、分别以新生大鼠心室肌心肌细胞和胚胎干细胞来源的心肌细胞为种子细胞构建工程化的心肌组织。 结果:建立起新生大鼠心室肌心肌细胞分离、培养和鉴定方法以及批量获得胚胎干细胞来源的心肌细胞的方法。在此基础上,分别采用新生大鼠心肌细胞和胚胎干细胞来源的心肌细胞为种子细胞构建了类天然的工程化心肌组织。 结论:采用新生大鼠心室肌心肌细胞和胚胎干细胞来源的心肌细胞可以构建出类天然的工程化心肌组织。