背景隐球菌是一种条件性致病真菌,其中仅新生隐球菌及其变种具有致病性。相关研究显示,隐球菌侵入人体的可能途径为通过呼吸道吸入,穿越肺血屏障后入血,播散至全身,甚至穿越血脑屏障而侵袭中枢神经系统。颅内压增高是隐球菌性脑膜脑炎最危险的临床症状之一,主要与炎症引起的脑水肿有关。目前本病脑水肿发生机制的研究较少,临床中缺乏根本治疗手段,因此,隐球菌性脑膜脑炎中脑水肿形成机制的研究显得尤为重要。目前对脑水肿形成机制的研究尚未完全明了,有研究发现AQP4与脑水肿密切相关。AQPs是一类处于持续开放状态的膜通道蛋白,其中AQP4选择性的高表达于中枢神经系统可能构成血脑屏障的第二道隔膜,起调节水运输的作用;另外有报道AQP4也也能是一种渗透压感受器或受体,对渗透压的变化具有渗透调节作用。在脑组织中水转运和平衡的维持与脑脊液密切相关,由此我们推测AQP4可能参与新生隐球菌感染后脑脊液的循环调节。目的探讨AQP4与隐球菌性脑膜脑炎所致脑水肿之间的关系:1、通过RNA干扰对脑组织中AQP4标准化表达进行抑制。2、经过对脑组织AQP4表达的抑制,使大鼠感染隐球菌性脑膜脑炎,观察经过抑制AQP4表达的火鼠和未经抑制的大鼠感染隐球菌性脑膜脑炎后脑组织含水量的变化。方法本实验我们在健康Wistar雌性大鼠右脑室注射脂质体包裹的AQP4短发央环质粒载体,用RNA干扰的方法将大鼠脑内AQP4表达进行下调,在下调后第7天(此时相为下调的峰值),右脑室接种隐球菌菌悬液,建立AQP4 RNAi大鼠隐球菌性脑膜脑炎模型,分别用western blotting和干-湿重法对RNA干扰后大鼠的脑内AQP4表达和脑组织含水量的动态变化进行研究和分析。结果1、RNAi组大鼠AQP4表达在干扰后第二天开始呈进行性减少,至术后第7天减少到峰值,术后第14天和第7天无明显差别,分别减少59.15%和58.87%,与对照组差异显著,有统计学意义。2、右脑室接种隐球菌菌悬液后,RNAi隐球菌感染组和隐球菌感染组脑组织含水量6h后开始明显升高,12h达高峰,其中隐球菌感染组为(83.61±0.44)%,RNAi隐球菌感染组为(85.67±0.59)%,假手术组各时间点均在78.52%左右。在6h、12h、24h和48h脑组织含水量各组比较差异显著,RNAi隐球菌感染组的脑水肿程度高于隐球菌感染组,并有显著差异,有统计学意义。结论我们的研究结果表明AQP4蛋白表达与新生隐球菌感染所致脑水肿的发生发展密切相;AQP4蛋白表达下调后中枢神经系统感染新生隐球菌,其脑水肿程度明显高于未下调组;说明在隐球菌感染的大鼠模型中,AQP4蛋白表达与其脑水肿程度呈负相关。AQP4是新生隐球菌感染所致脑水肿发生发展的关键因素之一,为揭示隐球菌性脑膜脑炎脑水肿的发生机制提供了理论基础。