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抗菌肽是天然免疫中的一种重要介质，是生物体在抵御病原微生物的防御反应过程中所产生的一类具有抗菌抗癌等生物活性的多肽。本论文中，Temporin-1CEa是从中国林蛙皮肤分泌物中提取出来的抗菌肽，由17个氨基酸组成，分子净电荷为+3，呈两亲性的α-螺旋结构，具有较好的抗癌活性。本论文主要探讨了抗菌肽Temporin-1CEa对人乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231、Bcap-37细胞的生物学效应和可能的作用机制。为此，我们首先通过MTT方法测定了Temporin-1CEa对包括3种乳腺癌在内的13种肿瘤细胞增殖的抑制作用；然后选取人乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231和Bcap-37细胞进行作用机制的研究：通过乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）法和Annexin V/PI双染法检测了Temporin-1CEa诱导乳腺癌细胞死亡的方式。在研究Temporin-1CEa对癌细胞膜的作用时，分别采用荧光探针DiBAC4(3)和CalceinAm/EthD-1对肿瘤细胞的膜电位，膜损伤程度及膜通透性进行考察；并通过荧光探针Rhodamine123、Fluo3-AM，分析Temporin-1CEa作用于乳腺癌细胞后线粒体膜电位以及细胞内钙离子浓度的的变化情况。结果显示：两栖类皮肤活性肽Temporin-1CEa分别作用于13种肿瘤细胞1h、6h、24h、48h后，大部分癌细胞在1h左右开始出现死亡，并与剂量呈正相关性，而正常的细胞则没有出现明显的死亡和生长抑制现象，其中除对人黑色素瘤A375细胞外，Temporin-1CEa对人乳腺癌细胞的作用较为敏感。因此，本论文主要选取3种不同的乳腺癌细胞作为进一步的研究对象，探讨Temporin-1CEa的作用机制。进一步研究结果显示，Temporin-1CEa以生物膜为主要作用靶点，首先使乳腺癌细胞细胞膜的膜电位升高，通透性增加。其进入细胞后，该肽可以使线粒体膜电位下降，损伤线粒体膜，使线粒体无法正常供给细胞能量；此外，细胞内游离钙离子浓度升高也可能参与了Temporin-1CEa引起的乳腺癌细胞毒性反应。