甲基化与非甲基化的Maspin基因在非侵入性产前诊断中的应用研究

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目的:本研究通过从孕妇血浆中提取胎儿游离DNA,应用荧光定量PCR对甲基化与非甲基化的Maspin基因进行绝对定量检测,并通过检测子痫前期孕妇体内胎儿游离DNA随妊娠期进展的变化情况来预测子痫前期的发生及预后,为非创伤性的产前诊断提供新的方法。方法:随机选择早、中、晚期正常孕妇各20例,分娩后24小时内的产妇10例,子痫前期孕妇20例及非妊娠妇女20例,其中以非妊娠妇女20例为对照组。提取血浆中的游离胎儿DNA,应用表观遗传学DNA甲基化技术对上述各例检测其甲基化与未甲基化Maspin基因的表达水平,并进行定性及其绝对定量。对正常早、中、晚期孕妇及其分娩后24小时内正常产妇样本均数进行两两对比式统计学分析,并对子痫前期晚期孕妇与正常晚期同期孕妇进行对比式统计学分析。结果:(1)应用表观遗传学DNA甲基化技术从母体血浆中检测特异性胎儿标志物—未甲基化Maspin基因(U-Maspin)可以推断胎儿DNA序列。(2)甲基化Maspin基因(M-Maspin)在早、中期正常孕妇血浆中的浓度与非妊娠妇女中的浓度差异无统计学意义(P>0.05),而在晚期正常孕妇与子痫前期孕妇体内呈显著性增高(P<0.01)。(3)未甲基化Maspin基因(U-Maspin)在非妊娠妇女血浆中未能检测到,在早、中、晚期正常孕妇血浆中的浓度随妊娠进展呈升高趋势(P<0.01),而在分娩后24小时内又迅速消失(P>0.05)。(4)未甲基化Maspin基因(U-Maspin)在子痫前期晚期孕妇体内的浓度与正常晚期同期孕妇比较呈异常增高(P<0.01)。结论:未甲基化Maspin基因(U-Maspin)在妊娠期的变化情况可以为非创伤性产前诊断的发展提供一种新的途径。
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