【摘 要】
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二型硫脂酶(TEII)是链霉菌体内聚酮类天然产物生物合成途径中的一种水解酶，在聚酮链延伸过程中通过移除异常中间体而起到编辑和纠错功能。YM-216391是链霉菌Streptomyces nobi
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二型硫脂酶(TEII)是链霉菌体内聚酮类天然产物生物合成途径中的一种水解酶，在聚酮链延伸过程中通过移除异常中间体而起到编辑和纠错功能。YM-216391是链霉菌Streptomyces nobilis JCM 4274发酵液中的环肽类天然产物，具有良好的抗肿瘤活性，但YM-216391的生物合成机制目前尚不清楚。本文比较研究了TEII对两种S．avermitilis突变株与野生型菌株阿维菌素产量的影响，并初步探讨了YM-216391的生物合成机制，为进一步研究YM-216391的基因簇和生物合成提供必要的实验基础。
研究表明：采用接合转移法将不同来源的TEII导入Streptomyces avermitilis NRRL8165中构建了两种突变株，经发酵后发现，导入Tetrocarcin A的TEII突变株对阿维菌素的产量提高了96.52％，而导入Chlorothricin的TEII突变株对阿维菌素的产量也提高了38.06％。验证了TEII对链霉菌次级代谢产物的生物合成具有纠错和编辑作用。
另外，以黏粒pJTU2554为载体，构建了YM-216391产生菌Streptomyces nobilisJCM4274的基因组文库。通过PCR扩增，克隆了JCM4274中可能的环化酶基因片段，建立JCM4274的接合转移系统，同时确定了JCM4274的发酵条件。
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