在口腔颌面外科中,创伤及肿瘤等疾患常引起的软组织、骨组织的缺损,如何恢复缺损区的外形及功能,恢复患者的生活质量,一直是临床上的难题之一,长期以来国内外学者进行了大量的相关基础研究与临床实践。目前能够应用于临床的修复方法主要还是应用自体骨移植修复,但这将使患者承受开辟第二手术区的痛苦,而且存在移植骨塑形难以与缺损骨形态一致等问题。 近年来随着细胞生物学及生物材料学的发展,组织工程学得到了快速发展,利用组织工程学方法和手段修复骨缺损是一种全新的骨修复模式。组织工程技术可以通过获取少量的组织细胞,经体外培养扩增后与支架复合,构建与病损区性状结构、生物学特性相近的细胞-支架复合体,以修复缺损组织。但在构建组织工程骨体内移植修复缺损时,必须保持植入体内的细胞成活并发挥功能。因此,在体内、体外预构一个有良好血液供应的组织工程骨瓣,从而保证细胞支架复合物的功能发挥至关重要。本研究在以下方面对血管化组织工程骨进行了初步研究:成骨细胞与血管内皮细胞体外联合共培养以观察两种细胞相互功能的影响;将两种细胞共培养复合背阔肌瓣预构血管化组织工程骨;应用血管化组织工程骨修复兔下颌骨非连续性缺损。本研究分为五部分: 论文一 兔成骨细胞与血管内皮细胞体外培养与鉴定 目的:在体外培养兔成骨细胞及血管内皮细胞并鉴定。方法:取出生24h日本大耳白兔四肢长骨作为成骨细胞来源,肾皮质微血管为血管内皮细胞来源,进行原代培养、传代培养、应用碱性磷酸酶染色、钙结节染色鉴定成骨细胞、Ⅷ因子免疫组化染色鉴定血管内皮细胞。结果:体外培养的成骨细胞磷酸酶染色阳性、钙结节染色为棕黑色钙盐沉积。血管内皮细胞传代培养后,Ⅷ因子免疫组化染色阳性,两种细胞均可达到95%以上阳性率。结论:兔成骨细胞与血管内皮细胞经传代培养后,仍然保持自我增殖能力及各自功能。 论文二 外消旋聚乳酸对血管内皮细胞活性的影响