目的:在前期确定益母草注射液水溶性生物碱是其缩宫的有效物质基础上,进一步探讨益母草注射液缩宫止血的药效物质基础及机制。方法:1.离体子宫平滑肌活动试验。采用阳离子交换树脂纯化法,制备益母草注射液水溶性总生物碱（简称益母草注射液总碱）。制备大鼠离体子宫模型和豚鼠离体子宫,给予上述总碱0.05、0.1、0.2 mg/mL,用Powerlab十六通道生理记录系统记录给药后10min内子宫平滑肌收缩曲线,观察比较给药前后子宫收缩活动力、频率和张力的变化;2.在体子宫平滑肌活动试验。制备大鼠在体子宫模型和豚鼠在体子宫模型,肌内注射益母草注射液总碱（10、20、40 mg/kg）,采用BL-420E生物机能实验系统记录给药大鼠60min内和豚鼠90 min内动物子宫平滑肌收缩曲线,观察比较给药前后子宫收缩活动力、频率和张力的变化。3.豚鼠流产试验。采用米非司酮联合米索前列醇药流法建立豚鼠流产模型,造模成功后,将动物分为模型组和益母草注射液总碱组,给药组灌胃0.17 g/kg益母草注射液总碱,连续7d,记录豚鼠子宫出血量,末次给药后取血ELISA法测定血清E₂、P含量,测定子宫比重,并采用试剂盒测定子宫组织中NO、ET-1、钙含量。4.缩宫活性成分筛选试验。运用大鼠和豚鼠离体、豚鼠在体子宫模型,给予益母草注射液水溶性生物碱单体水苏碱、胆碱、葫芦巴碱,运用BL-420E生物机能实验系统记录给药后10 min内子宫平滑肌收缩曲线,观察比较给药前后子宫收缩活动力、频率和张力的变化;运用豚鼠在体子宫模型,给予益母草注射液水溶性生物碱单体水苏碱、胆碱、葫芦巴碱,缩宫素及益母草注射液,运用BL-420E生物机能实验系统记录给药后90 min内子宫平滑肌收缩曲线,观察比较给药前后子宫收缩活动力、频率和张力的变化;运用豚鼠离体子宫模型,给予不同的工具药后,再观察水苏碱对子宫活动的影响。结果:1.对离体子宫平滑肌活动的影响。0.05 mg/mL益母草注射液总碱可显著增强大鼠离体子宫收缩活动力、频率及最大值,0.1、0.2 mg/mL对子宫收缩活力、频率、平均值、最大值有增强趋势;0.05、0.1、0.2 mg/mL益母草注射液总碱可明显增强豚鼠离体子宫收缩最大值。2.对在体子宫平滑肌活动的影响。10、40mg/kg益母草注射液总碱肌内注射可增加正常大鼠在体子宫收缩活力、平均值;10、20、40mg/kg益母草注射液总碱可增加正常豚鼠在体子宫收缩最大值。3.对豚鼠流产子宫的影响。0.17 g/kg益母草注射液总碱灌胃流产模型豚鼠,可降低子宫出血量,显著降低子宫脏器比重系数、子宫组织的NO和P含量,增加子宫组织的钙含量,ET的含量。4.缩宫活性成分筛选结果。离体子宫试验中,3×10^-5mol/L水苏碱、胆碱、葫芦巴碱单独应用可显著降低大鼠正常离体子宫收缩最大值,显著增加豚鼠正常离体子宫收缩活动力和降低收缩频率;在体子宫试验中,肌内注射1 mg/kg水苏碱可显著增强未孕豚鼠在体子宫的收缩活动力、平均值及最大值,1 mg/kg胆碱可显著降低给药后60-80 min未孕豚鼠在体子宫收缩频率,显著增加给药后0-10 min子宫收缩最大值,1 mg/kg葫芦巴碱可显著增加给药后20-40 min未孕豚鼠在子宫收缩活动力,20-90 min收缩最大值,0.83U/kg缩宫素可显著增加给药后90min内未孕豚鼠在体子宫的收缩活动力、平均值、最大值,能够显著增加给药后10-30min内正常豚鼠在体子宫的收缩频率、10-80min内收缩最小值,0.17m L/kg益母草注射液可显著增加给药后90min内正常豚鼠在体子宫的收缩活动力、平均值,80min内收缩最大值,10-20min内收缩频率,10-90min收缩最小值;L型Ca²⁺通道阻断剂维拉帕米可明显拮抗水苏碱对未孕豚鼠离体子宫的兴奋作用。结论:1.益母草注射液总碱能兴奋正常豚鼠离体子宫和在体子宫,具有缩宫作用,是益母草注射液缩宫的重要有效物质。2.益母草注射液总碱可减少流产豚鼠流产出血量和促进子宫修复,机制与调节子宫组织血管舒缩相关物质分泌有关,也可能与其促进子宫收缩有关。3.水苏碱、胆碱和葫芦巴碱是益母草注射液缩宫的有效成分,其中水苏碱作用机制可能与兴奋Ca²⁺通道相关。