胸腺五肽对创伤-失血性休克大鼠T淋巴细胞亚群与肠粘膜屏障功能的影响

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目的:通过建立重度创伤-失血性休克大鼠模型,观察在常规应用乳酸林格液复苏以及加用胸腺五肽复苏两组大鼠后对外周血T淋巴细胞亚群以及血浆中二胺氧化酶(DAO)、内毒素(ET)的含量以及小肠粘膜形态的影响,以探讨常规液体复苏加用胸腺五肽治疗创伤-失血性休克的效果及可能机制。方法:实验用健康雄性SD大鼠70只,随机分为3组:假休克组(SS组,n=10)、乳酸林格液复苏组(LRS组,n=30)、乳酸林格液+胸腺五肽复苏组(LRS+TP组,n=30)。LRS组、LRS+TP组各取12、24、48小时3个时间点,每个时间点10只动物。创伤-失血性休克模型制作完成后,LRS组将血液回输并输入两倍量的乳酸林格氏液进行复苏,30分钟内输完;LRS+TP组将血液回输并输入两倍量的乳酸林格氏液进行复苏的同时腹腔内注射胸腺五肽0.3mg/kg/d。应用流式细胞仪检测各时间点外周血CD4+、CD8+细胞数比例,用ELISA试剂盒检测各组不同时间点血浆中DAO、ET的水平,在光镜下观察小肠组织的形态学改变及形态学测量,实验结果进行统计学分析。结果:1.淋巴细胞亚群的比较:LRS组CD4+细胞数在12h、24h、48h均降低,CD8+细胞数在12h、24h、48h升高,CD4+/CD8+比值各时间点均下降,与SS组相比有显著性差异(P <0.05)。LRS+TP组12h CD4+细胞数下降,与SS组比较有统计学意义(P <0.05),24h、48h逐渐升高至正常范围,与LRS组比较有显著差异(P <0.05),CD8+细胞数12h、24h与SS组相比有显著性差异(P <0.05),但在48h其值显著降低,与SS组无显著性差异(P >0.05),与LRS组比较CD8+细胞数在24h、48h有统计学意义。LRS+TP组与LRS组CD4+/CD8+比值相比在各时间点均有统计学意义(P <0.05)。2.DAO比较:实验发现LRS组与LRS+TP组12h、24h、48h三个时间点其DAO值均高于SS组(P <0.05),LRS组在24h达到高峰,其后下降,但降幅较小,而LRS+TP组在复苏后24h即出现明显下降趋势,复苏48h后明显下降。LRS+TP组与LRS组相比24h、48h DAO含量均有统计学意义(P <0.05)。3.ET比较:LRS组与LRS+TP组12h、24h、48 h三个时间点其ET值均高于SS组(P <0.05),LRS组在24h达到高峰,其后下降,下降幅度较小,而LRS+TP组24h、48h下降明显。LRS+TP组与LRS组相比在24h、48h ET值有统计学意义(P <0.05)。4.病理改变及粘膜形态学计量比较:两组复苏后肠道粘膜形态仍未完全恢复正常,比较发现:LRS+TP组与LRS组相比,在各时间点小肠绒毛病理改变都较轻,大体形态比较完整,排列整齐,无断裂现象;上皮细胞排列较整齐,有少量细胞发生变性,但未见细胞坏死现象;小肠腺体萎缩情况较轻,LRS+TP组小肠绒毛高度与肠粘膜厚度在24h和48h均高于LRS组(P <0.05)。结论:1.创伤-失血性休克大鼠动物模型制作成功,而且模型有较好可控性、可操作性及可重复性。2.加用胸腺五肽用于复苏创伤-失血性休克大鼠与单纯乳酸林格液相比,提高CD4+T淋巴细胞数量,使CD4+/CD8+比值趋于正常,提高机体的细胞免疫能力。3.加用胸腺五肽用于复苏创伤-失血性休克大鼠,在提高机体细胞免疫功能的同时,可有效降低肠屏障功能的损伤,减轻肠粘膜的通透性,维持大鼠肠粘膜形态、结构的完整性。4.加用胸腺五肽复苏创伤-失血性休克大鼠与单纯乳酸林格液复苏相比,对其生存率虽然有提高,但经统计学分析无显著性差异。
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