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条斑紫菜（P.yezoensis）是我国重要的经济类海藻之一，隶属于红藻纲，红毛菜科。主要分布在日本、韩国和中国。 本研究首先以条斑紫菜CaM基因和HSP70基因为关键词，在GeneBank的dbEST数据库中搜索相关的EST片段，使用DNAMAN软件对搜索得到的EST片段进行拼接，分别得到两条contig。利用NCBI网站的BlastX功能进行序列分析，分析结果指向其他物种CaM基因和HSP70基因。通过序列比对，contig引物设计，PCR产物回收，获得这两条基因，并通过测序进行验证，命名为PyCaM，PyHSP70。生物信息学分析显示，PyCaM ORF序列共453bp，编码150个氨基酸，起始密码子为ATG，终止密码子为TGA，编码蛋白质的分子量约为16700Da，等电点为4.12，信号肽预测结果显示PyCaM无信号肽序列。对PyCaM核苷酸序列进行BLASTx分析，结果显示，与其他藻类CaM核苷酸序列相似性较高，达到90％以上，并预测到EF手型区域以及钙离子结合位点;PyHSP70ORF序列共2007bp，编码668个氨基酸，起始密码子为ATG，终止密码子为TAG，编码蛋白质的分子量约为72000Da，等电点为5.17，信号肽预测结果显示PyHSP70无信号肽序列。将PyCaM、PyHSP70 ORF序列分别与pET-28a载体重组，构建两个重组表达载体，并转入大肠杆菌BL21感受态细胞，获得转基因菌株，经IPTG诱导融合蛋白表达，利用SDS-PAGE电泳检测证实PyCaM分子量约为16700Da，PyHSP70分子量约为71000Da，与预测值相符合。将大量诱导的蛋白进行纯化和质谱检测，证明此二蛋白即为条斑紫菜PyCaM、PyHSP70融合蛋白。 从实时荧光定量PCR的结果可以看出，条斑紫菜PyHSP70、PyCaM基因响应高温诱导并显著高于对照组，分别在热胁迫1小时、3小时时转录水平达到最高。通过测定条斑紫菜PyHSP70融合蛋白的ATPase活性，证明PyHSP70具有ATPase活性。在测定大肠杆菌转条斑紫菜PyHSP70基因在高温胁迫下生长情况的实验中，转基因大肠杆菌的生长情况明显好于对照组，证明条斑紫菜PyHSP70融合蛋白的过量表达可以提高大肠杆菌的耐热性。本研究第一次利用凝胶覆盖技术证明条斑紫菜融合蛋白PyCaM与PyHSP70在体外具有结合效应，这些结论对进一步研究植物热激信号转导通路奠定理论基础。