论文部分内容阅读
目的:
观测电针对睡眠剥夺大鼠学习、记忆能力的作用。采用Morris水迷宫检测大鼠定位航行实验的逃避潜伏期和空间探索实验进入目标区域的次数,用WesternBlot检测p250GAP、Rac1、Cdc42的表达,用免疫组化检测p250GAP及其下游蛋白Rac1、Cdc42的表达,探究电针对睡眠剥夺大鼠学习记忆能力及神经突触可塑性的作用。
方法:
采用分层随机化方法将40只雄性清洁级SD大鼠分为4组,即:
空白对照组:其他3组造模时本组大鼠在大平台水环境中饲养,电针组、假电针组大鼠接受针刺时本组大鼠用相同方法抓取;
模型组:制备大鼠REM期睡眠剥夺模型,不予针刺干预,电针组、假电针组大鼠接受针刺治疗时本组大鼠用相同方法抓取;
电针组:制备大鼠REM期睡眠剥夺模型,造模过程中每天给予电针治疗;
假电针组:制备大鼠REM期睡眠剥夺模型,造模过程中每天给予假电针干预。
睡眠剥夺模型制作第一天起进行电针治疗,于每天上午9:00开始电针刺激电针组大鼠的“百会”和“大椎”穴;对假电针组大鼠针刺干预时,避开穴位,分别在“百会”和“大椎”穴处向外旁开4mm,且连接脉冲治疗仪后不通电。每日治疗1次,每次15min,连续治疗5d。最后一次治疗结束后,测试大鼠逃避潜伏期与通过目标区域次数。最后采用WesternBlot检测海马组织中p250GAP及下游蛋白Rac1、Cdc42的表达,免疫组化检测p250GAP及下游蛋白Rac1、Cdc42的阳性表达。
结果:
1.模型制作与治疗结束后电针组大鼠的体重下降,毛发潮湿、凌乱,与空白对照组相比表现烦躁不安。假电针组大鼠体重下降明显,皮毛晦暗、凌乱,烦躁,被抓取时反抗尤其剧烈;模型组大鼠的体重明显减轻,且皮毛晦暗、凌乱,烦躁,与空白对照组有显著性差异。
2.模型制作与治疗结束后,各组大鼠定位航行能力测试结果显示:模型组和空白对照组大鼠逃避潜伏期时长相比有显著性差异(P<0.05);假电针组与模型组逃避潜伏期时长相比差异无统计学意义(P>0.05);电针组与模型组逃避潜伏期时长相比有显著性差异(P<0.05)。空间探索能力测试结果显示:模型组与空白对照组穿越原平台的次数以及进入原平台所在象限的次数比较有显著性差异(P<0.05);假电针组与模型组相比无统计学意义(P>0.05);电针组与模型组相比有显著性差异(P<0.05)。
3.各组p250GAP相对含量比较,模型组与空白对照组相比,p250GAP相对含量较高(P<0.05);电针组与模型组比较相对含量较低(P<0.05);假电针组与模型组相比相对含量略低,但无统计学意义(P>0.05);各组Racl相对含量比较,模型组与空白对照组相比较低(P<0.05);电针组较模型组较高(P<0.05),模型组与假电针组相对含量无显著性差异(P>0.05);各组Cdc42相对含量比较,模型组与空白对照组相比较低(P<0.05),电针组较模型组较高(P<0.05),模型组与假电针组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
4.p250GAP免疫组化染色结果显示,模型组较空白组细胞质内棕黄色阳性表达的细胞较多;假电针组与模型组阳性细胞差异不明显;电针组与模型组相比阳性表达细胞较少;从Rac1和Cdc42免疫组化染色结果可以看出,模型组较空白对照组棕黄色阳性表达细胞明显较少;假电针组与模型组阳性表达细胞差异不明显;电针组较模型组阳性表达细胞明显较多。
结论:
1.电针治疗能显著提高睡眠剥夺大鼠的学习、记忆能力。
2.电针对p250GAP的表达有抑制作用,对Rac1、Cdc42的表达有促进作用。
3.电针提高大鼠学习、记忆能力的机制可能是通过抑制p250GAP的表达,提高Rac1和Cdc42的活性,从而提高大鼠海马的神经突触可塑性。
观测电针对睡眠剥夺大鼠学习、记忆能力的作用。采用Morris水迷宫检测大鼠定位航行实验的逃避潜伏期和空间探索实验进入目标区域的次数,用WesternBlot检测p250GAP、Rac1、Cdc42的表达,用免疫组化检测p250GAP及其下游蛋白Rac1、Cdc42的表达,探究电针对睡眠剥夺大鼠学习记忆能力及神经突触可塑性的作用。
方法:
采用分层随机化方法将40只雄性清洁级SD大鼠分为4组,即:
空白对照组:其他3组造模时本组大鼠在大平台水环境中饲养,电针组、假电针组大鼠接受针刺时本组大鼠用相同方法抓取;
模型组:制备大鼠REM期睡眠剥夺模型,不予针刺干预,电针组、假电针组大鼠接受针刺治疗时本组大鼠用相同方法抓取;
电针组:制备大鼠REM期睡眠剥夺模型,造模过程中每天给予电针治疗;
假电针组:制备大鼠REM期睡眠剥夺模型,造模过程中每天给予假电针干预。
睡眠剥夺模型制作第一天起进行电针治疗,于每天上午9:00开始电针刺激电针组大鼠的“百会”和“大椎”穴;对假电针组大鼠针刺干预时,避开穴位,分别在“百会”和“大椎”穴处向外旁开4mm,且连接脉冲治疗仪后不通电。每日治疗1次,每次15min,连续治疗5d。最后一次治疗结束后,测试大鼠逃避潜伏期与通过目标区域次数。最后采用WesternBlot检测海马组织中p250GAP及下游蛋白Rac1、Cdc42的表达,免疫组化检测p250GAP及下游蛋白Rac1、Cdc42的阳性表达。
结果:
1.模型制作与治疗结束后电针组大鼠的体重下降,毛发潮湿、凌乱,与空白对照组相比表现烦躁不安。假电针组大鼠体重下降明显,皮毛晦暗、凌乱,烦躁,被抓取时反抗尤其剧烈;模型组大鼠的体重明显减轻,且皮毛晦暗、凌乱,烦躁,与空白对照组有显著性差异。
2.模型制作与治疗结束后,各组大鼠定位航行能力测试结果显示:模型组和空白对照组大鼠逃避潜伏期时长相比有显著性差异(P<0.05);假电针组与模型组逃避潜伏期时长相比差异无统计学意义(P>0.05);电针组与模型组逃避潜伏期时长相比有显著性差异(P<0.05)。空间探索能力测试结果显示:模型组与空白对照组穿越原平台的次数以及进入原平台所在象限的次数比较有显著性差异(P<0.05);假电针组与模型组相比无统计学意义(P>0.05);电针组与模型组相比有显著性差异(P<0.05)。
3.各组p250GAP相对含量比较,模型组与空白对照组相比,p250GAP相对含量较高(P<0.05);电针组与模型组比较相对含量较低(P<0.05);假电针组与模型组相比相对含量略低,但无统计学意义(P>0.05);各组Racl相对含量比较,模型组与空白对照组相比较低(P<0.05);电针组较模型组较高(P<0.05),模型组与假电针组相对含量无显著性差异(P>0.05);各组Cdc42相对含量比较,模型组与空白对照组相比较低(P<0.05),电针组较模型组较高(P<0.05),模型组与假电针组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
4.p250GAP免疫组化染色结果显示,模型组较空白组细胞质内棕黄色阳性表达的细胞较多;假电针组与模型组阳性细胞差异不明显;电针组与模型组相比阳性表达细胞较少;从Rac1和Cdc42免疫组化染色结果可以看出,模型组较空白对照组棕黄色阳性表达细胞明显较少;假电针组与模型组阳性表达细胞差异不明显;电针组较模型组阳性表达细胞明显较多。
结论:
1.电针治疗能显著提高睡眠剥夺大鼠的学习、记忆能力。
2.电针对p250GAP的表达有抑制作用,对Rac1、Cdc42的表达有促进作用。
3.电针提高大鼠学习、记忆能力的机制可能是通过抑制p250GAP的表达,提高Rac1和Cdc42的活性,从而提高大鼠海马的神经突触可塑性。