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致病性弧菌(Pathogenic Vibrio)属于弧菌属(genus Vibrio),有12个种,包括霍乱弧菌(Vibrio cholerae)、副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、创伤弧菌(Vibrio vulnificus)、海鱼弧菌(Vibrio damsela)、拟态弧菌(Vibrio mimicus)、辛辛那提弧菌(Vibrio cincinnatiensis)、梅氏弧菌(Vibrio metschnikovii)、霍利斯弧菌(Vibrio hollisae)、河流弧菌(Vibrio fluvialis)、弗尼斯弧菌(Vibrio furnissii)、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)和鲨鱼弧菌(Vibrio carchariae)。致病性弧菌是影响水产品安全的重要因素,通常存在于近海海水、海底沉积物、浮游生物、海产品(鱼类和贝类)中,是夏秋季沿海地区引发食物中毒的首要病原菌。人类多因食入未煮熟的海产品或污染此菌的盐渍食物而感染；主要症状为腹痛、腹泻、呕吐和发热等。如果不及时治疗,可能会危急生命。选择性鉴别培养基是在生化反应的基础上开发的技术,它将传统的细菌分离与生化反应有机的结合起来,使得检测结果直观,易于观察辨别,且具有低成本、特异性强、灵敏度高和检测快速、操作方便等优点。选择性鉴别培养基是国内外微生物检测发展的一个主要发展方向。目前,致病性弧菌仅有副溶血性弧菌、霍乱弧菌和创伤弧菌具有选择性鉴别培养基,其它致病性弧菌尚没有。本研究的目的和意义是设计和研制其它致病性弧菌的选择性鉴别培养基,以满足和储备日益严格的食品安全标准和不同检测条件的需求。本论文主要围绕以下几个方面开展了一些工作：1致病性弧菌增菌培养基及培养条件的改进研究本试验对弧菌增菌培养基(VEM)及培养条件进行改进研究,经过优化,获得一套适用于致病性弧菌增菌的VEM及培养条件。试验结果表明：以副溶血性弧菌为代表,用VEM在(36±1)℃+摇床120 r/min+2层牛皮纸封口条件下增菌培养,在相同时间内,其增菌菌液浓度是GB/T4789.7-2008中规定方法的碱性蛋白胨水(APW)增菌菌液浓度的1.8±0.6倍；对12中致病性弧菌进行的增菌培养试验结果表明,VEM能有效促进12种致病性弧菌的生长繁殖。VEM组成为：混合蛋白胨2%(胰蛋白胨：鱼蛋白胨为1：3)、酵母浸膏0.2%、NaCl3%、pH8.6。这为后续工作的顺利开展奠定了基础。2创伤弧菌选择性鉴别培养基的研制本试验以创伤弧菌特有的酶系统及其代谢特点和对某些特定抑菌成分的抵抗力为基础,设计研制了创伤弧菌选择性鉴别培养基(VvDM)。试验中对VvDM的显色效果、平板效率、灵敏度和特异性进行评价。结果显示：VvDM对创伤弧菌具有较好的选择性和特异性；用VvDM在39℃培养16 h-24 h,创伤弧菌菌落为黄色；其它各种弧菌及非弧菌属致病菌菌落呈绿色或未形成有效的可见菌落；VvDM对创伤弧菌的出菌效率与嗜盐琼脂相比为(92.42±3.43)%；检出限为101 cfu/mL;因此,VvDM对海产品中创伤弧菌分离鉴别与检测是可行的,且具有操作简便、经济、结果易于观察等优点。3拟态弧菌选择性鉴别培养基的研究本试验以拟态弧菌特有的酶系统及其代谢特点和对某些特定抑菌成分的抵抗力为基础,设计研制了拟态弧菌选择性鉴别培养基(VmDM)。试验中对VmDM的显色效果、平板效率、灵敏度和特异性进行评价。结果显示：37℃培养24 h时,VmDM对拟态弧菌具有较好的选择性和特异性；拟态弧菌菌落为绿色或蓝绿色,其它弧菌菌落呈黄色或没有有效菌落形成；VmDM对拟态弧菌的出菌效率与嗜盐琼脂相比为(90.1±6.8)%；检出限为102cfu/mL。因此,VmDM对海产品中拟态弧菌分离鉴别与检测是可行的,且具有操作简便、经济、结果易于观察等优点。4辛辛那提弧菌选择性鉴别培养基的研制本试验基于辛辛那提弧菌特有的综合酶系统及其代谢特点和对某些抑菌剂的抵抗力,设计开发出辛辛那提弧菌选择性鉴别培养基(VciDM).试验中对VciDM的显色效果、平板效率、灵敏度和特异性进行评价。结果显示：37℃培养16h-24h, VciDM对辛辛那提弧菌具有较好的选择性和特异性；辛辛那提弧菌菌落为黄色,其它致病菌菌落呈绿色或没有有效菌落形成；VciDM对辛辛那提弧菌的出菌效率与嗜盐琼脂相比为(82.14±4.45)%；检出限为101cfu/mL。因此,VciDM对海产品中辛辛那提弧菌分离鉴别与检测是可行的,且具有操作简便、经济、结果易于观察等优点。5海鱼弧菌的选择性鉴别培养基的研制本试验以海鱼弧菌特有的综合酶系统及其代谢特点和对某些抑菌剂的抵抗力为基础,设计开发出海鱼弧菌选择性鉴别培养基(VdDM)。试验中对VdDM的显色效果、平板效率、灵敏度和特异性进行评价。结果显示：37℃培养16h-24h, VdDM对海鱼弧菌具有较好的显色效果、平板效率、选择性和特异性；海鱼弧菌菌落为绿色：其它致病菌菌落呈黄色或未形成有效的可见菌落；VdDM对海鱼弧菌的出菌效率与嗜盐琼脂相比为(83.46±3.42)%；检出限为101 cfu/mL。因此,VdDM对海产品中海鱼弧菌分离鉴别与检测是可行的,且具有操作简便、经济、结果易于观察等优点。VEM分别与四种选择性鉴别培养基结合检测目标致病性弧菌的方法与常规方法(TCBS结合法国梅里埃细菌鉴定系统API 20E试剂条或弧菌科生化鉴定管)相比,结果直观,易于观察,减少了溶藻弧菌等常伴菌的干扰,省去了TCBS分离培养后的生化试验,降低检测成本,减少工作量,操作简便,具有更高的检测效率和鉴别能力。