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面肩肱型肌营养不良症（FSHD）是一种进行肌肉疾病，多于30岁以前 发病，面肌总有受累；然后是肩肿带肌，能后是盆带肌等的萎缩和力弱。力弱 可不对称，寿命不受影响。95%的病人20岁时已有11临床表现。跟病率为1/20， 000。 FSHD呈常染色体显性遗传，80％以上的家系基因耶于4q35，尚有部分家 系基因定位仍然不清楚。1990年C W1jlmenga等首次将FSHD基因触于4号 染色体妮，现已明确，FSHD是由于称为D4Z4白DNA结构内 3 3kb KPnI串联重 复单元有部分缺失，其重复单元数目从12-100以上，减少至11个以下。具体 致病基因不清。 80％以上的FSHD病地固触于4q35，使该病的基因诊断成为可能。正常 人 4q35的 3 3kb KpnI串联重复单元存在于 50-320kb的 EcoR片段内。而在 FSHD 病人，存在该串联重复单元的部分缺失，引起EcoR I片段的分子量减小至 38－41kb以下。用 p13E－11探针可检测该片段的存在。但 10qter与 4q35具有 同源性，与 pl 3E-11 杂交后的 EcoR片段有时难以区分来源，为了明确 FSHD 病人 4q35内 Kpn串联重复单元缺失情况，本研究应用了 DNA内切酶Binl， Bin可使10qter p13E－11 EcoR片段被切碎，从电永结果中消失。但却不影响 对来自 4q35的 ECOR片段分子量减少的判断。概因检查中划分FSHD和正常 人界线尚不清楚，但多数研究者以 38kb为界。FSHD病人的 p13E一11 EcoR I／Bin I片段分子量多小于 38kb，正常人多大于 38kb。 本研究中，从10m1外周血中，先后采用了酚-氯仿－异戊醇法和低熔点琼。 脂糖凝胶块法两种方法来提取基因组 DNA，EcoR／Bln双酶切后进行脉冲场 凝胶电冰，转膜后用 pl 3E－11探针进行 Southern DNA杂灭。在脉冲场电冰、探 针的扩增和 Southern杂交等方面均采用了独特的方法。本研究共检测 FSHD病 人26例，p13E－11 EcoR／Bln 片段小于 38kb者 20例，占 76 92％，FSHD亲 2 解放军巳医院 军医进修学院 博士学JI论i 翩 12例，该片段，J｛38kb者 2例，占 16．67儿对照组 22例，该片段大于 38kb 者 21例，占 95 45％。本研究结粕洲阶致。76 92％的 FSHD A地因检 查 4q35 ECOR片鞋d卜子量J、＋ 38kb。才／刃究成功到J乞隆T拍臼汁 P13Ell，h 本实验室烯断FSHD基因诊断加打下了物质基础，模索出了4嘛脂糖胶块 提取和酶切基因组DNA6方法，使DNA好完整，贩高，创民了栅DNA分 子易懈、瓜刻蛐缺占，利于进一步操作，模出了赃的财场电)衣仪对基 因组洲A中m 刁 okb M电柑离的雕橄，跄了用摊电永仪分不开大 忖量 DNA M的问题模出了 Southern杂灭中栅 pl 3E一11 与基因组 4q35 ECOR DNA片段反应的合适条件，并使条带显示清楚。该方浙以瞅基因诊 断方法FSHD病人和携带者进行辅助临床诊断，还可考献胎)M怖产抛因检 查。