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本课题分两部分，分别从凝血因子Ⅶ（factor Ⅶ，FⅦ）基因多态性和启动子区甲基化水平两个方面研究了急性颅脑创伤（traumatic brain injury，TBI）后FⅦ活性（activated factor Ⅶ，FⅦa）水平及发生凝血功能障碍的影响因素。各部分研究摘要如下：第一部分凝血因子Ⅶ基因多态性在颅脑创伤性凝血功能障碍中的作用目的：阐述FⅦ基因多态性对TBI患者血浆FⅦa水平的影响，分析不同基因型与TBI后凝血功能障碍之间的相关性。方法：收集符合入选条件的84例单纯性TBI患者血液，测定伤后24小时内血浆FⅦa水平，同时检测国际标准化比值和活化部分凝血酶原时间等凝血指标。对患者血液基因组进行提取，并运用聚合酶链式反应以及限制性片段长度多态性（polymerasechain reaction and restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP）方法检测FⅦ的-323P0/P10、R353Q、-401G/T、-402G/A、-670A/C和IVS7六个多态性位点的基因型，建立二元和多元回归模型，寻找关键的影响FⅦa水平的多态性位点，并确定其与TBI患者凝血功能异常之间的关系。结果：FⅦ多态性位点-323P0/P10、R353Q、-401G/T、IVS7不同基因型之间的FⅦa差异显著（P <0.05），而在-402G/A和-670A/C两个位点各基因型之间差异不显著（P>0.05）。-323P0/P10的P10等位基因、R353Q的Q等位基因、IVS7的H7等位基因是FⅦa低于77.5%的危险因素。多变量逻辑回归分析，结果显示R353Q的Q等位基因［优势比（odds ratio，OR）=4.401，95%可信区间（confidence interval，CI）=1.275～15.190，P=0.019）］是导致FⅦa <77.5%的独立危险因素。-323P0/P10的P10等位基因（OR=12.323，95%CI=1.445～105.062，P=0.022）是导致TBI患者继发凝血功能障碍的独立危险因素。单倍型为P10-H7-Q的患者发生凝血病的风险显著高于其他单倍型患者（OR=7.624，95%CI=1.325～43.888，P=0.037）。结论：R353Q的Q等位基因与FⅦa下降密切相关，而-323P0/P10的P10等位基因可作为独立因素导致TBI患者发生凝血病。同时，单倍型为P10-H7-Q的患者发生凝血病的风险显著高于其他单倍型患者。第二部分凝血因子Ⅶ启动子区甲基化在颅脑创伤性凝血功能障碍中的作用目的：研究TBI患者FⅦ启动子区甲基化水平对血浆FⅦa水平的影响，及其与继发凝血功能障碍之间的相关性。方法：收集符合入选条件的84例单纯性TBI患者血液，测定伤后24小时内血浆FⅦa水平，同时检测国际标准化比值和活化部分凝血酶原时间等凝血指标。甲基化百分比参数（percentage of methylated reference，PMR）以4为临界点，PMR>4定义为甲基化。对患者血液基因组进行提取，并进行亚硫酸氢盐处理，运用甲基化荧光检测（Methylight）方法定量检测FⅦ启动子区域甲基化水平，确定FⅦ启动子区甲基化程度与FⅦa水平和凝血功能异常之间的关系。最后将FⅦ基因多态性纳入回归分析。结果：采用Spearman相关性分析，结果发现代表FⅦ启动子区甲基化水平的PMR值与FⅦa呈显著的负相关（R=-0.249，P=0.027），且PMR在凝血病组中为5.98±7.32，显著高于无凝血病患者（2.09±1.98）（P=0.001）。运用双变量回归分析，发现升高的PMR为FⅦa <77.5%和发生凝血病的显著危险因素。联合FⅦ基因多态性和启动子区甲基化分析与FⅦa及凝血病的关系，结果显示：（1）-323P0/P10的P10等位基因、R353Q的Q等位基因、IVS7的H7等位基因及PMR>4是FⅦa低于77.5%的危险因素，而除外-401G/T的T等位基因等。逐步回归分析结果表明，IVS7的H7等位基因（OR=5.024，95%CI=1.143～22.076，P=0.033）是导致FⅦa <77.5%的独立危险因素；（2）运用逻辑回归分析凝血病的危险因素，发现血小板计数<150×109/L，活化部分凝血酶时间>32s以及PMR>4是发生凝血病的危险因素，而除外-323P0/P10的P10等位基因、R353Q的Q等位基因、IVS7的H7等位基因、-401G/T的T等位基因、年龄＞50岁、硬膜外血肿及蛛网膜下腔出血等因素。多变量逻辑回归分析显示PMR>4（OR=4.280，95%CI=1.398～13.104，P=0.011）是引起TBI患者凝血病的独立危险因素。结论：FⅦ启动子区域甲基化水平升高是FⅦa降低和发生凝血病的危险因素。IVS7的H7等位基因是导致FⅦa <77.5%的独立危险因素，而PMR>4是引起TBI患者凝血病的独立危险因素。