论文部分内容阅读
第一章趋化因子在卵巢上皮性癌发生发展的生物学作用研究进展(文献综述)卵巢恶性肿瘤是女性生殖系统常见的肿瘤,它是妇科三大恶性肿瘤之一,发病率仅次于宫颈癌,居第二位。卵巢上皮性癌约占卵巢恶性肿瘤的80%,卵巢肿瘤微环境中趋化因子系统可以影响卵巢肿瘤细胞的存活、生长、迁移、血管形成以及肿瘤免疫细胞浸润。卵巢上皮性癌的转移是一个严密的、非随机的、器官选择性的过程,其特异性转移取决于它所表达的趋化因子受体及靶器官所表达的趋化因子。趋化因子及其受体主要通过卵巢肿瘤逃避免疫杀伤,诱导卵巢肿瘤细胞迁移,刺激血管形成,促进细胞基质降解四种方式促进卵巢肿瘤浸润转移。研究表明,IL-8在很多肿瘤的发生发展及浸润转移中发挥重要作用,在卵巢上皮性癌中也扮演重要的角色。本课题研究IL-8对卵巢上皮性癌浸润转移的影响及相关机制,为临床诊断、治疗及评估卵巢上皮癌的预后提供依据。第二章IL-8三种亚型介导对卵巢上皮性癌SKOV3细胞生物学功能的影响背景与目的：卵巢癌的进展是一种多因素、多环节、多阶段的过程,近来研究表明卵巢癌患者白介素(IL-8)水平显著高于良性肿瘤患者及健康人群,卵巢癌的生长和转移可能与IL-8的过度表达有关,但尚无报道表明IL-8主要亚型在卵巢癌中的作用。本研究探讨IL-8的3种亚型IL-8(1-77)、IL-8(5-77)和IL-8(9-77)对卵巢癌SKOV3细胞的增殖、生长、迁移和侵袭能力的影响及其作用机理。方-法：确认分别获得IL-8的3种亚型稳定转染的SKOV3细胞后,应用MTT比色测定法比较各细胞的生长曲线；采用流式细胞仪比较各细胞的细胞生长周期；采用集落形成实验比较各组细胞的克隆率；运用Transwell小室比较各细胞体外迁移和侵袭能力。结果：IL-8(1-77)-pwpi-SKOV3细胞和IL-8(5-77)-pwpi-SKOV3在G2期的比率明显高于pwpi-SKOV3和SKOV3(P=0.017和0.020); IL-8(1-77)-pwpi-SKOV3和IL-8(5-77)-pwpi-SKOV3细胞克隆率明显高于IL-8(9-77)-pwpi-SKOV3、pwpi-SKOV3和SKOV3(p=t0.000和0.001)；细胞体外迁移能力多组间差异无统计学意义(2>0.05),但细胞体外侵袭能力IL-8(1-77)-pwpi-SKOV3和IL-8(5-77)-pwpi-SKOV3明显强于IL-8(9-77)-pwpi-SKOV3、pwpi-SKOV3和SKOV3(p=0.000和0.002)。结论：IL-8(1-77)和IL-8(5-77)可能促进卵巢癌SKOV3细胞的生长和增殖,并增强其侵袭能力,而IL-8(9-77)对卵巢癌SKOV3细胞增殖可能有抑制作用。第三章白介素8(IL-8)对人卵巢癌诊断价值的Meta分析目的：用Meta分析(meta-analysis)的方法对国内外资料进行统计学分析,评价IL-8在诊断卵巢癌中的价值.方法：以Pubmet、Medline为英文文献主要来源,以中国生物医学文献数据库、万方中文期刊数据库为中文文献主要来源,搜索1995年以来国内外公开发表的IL-8诊断卵巢癌的文献；按Meta分析的要求和诊断性试验公认的质量标准确定纳入和排除标准,对搜索到的文献进行质量评价,根据纳入标准和排除标准确定纳入Meta分析的文献,以汇总的方法计算出IL-8对卵巢癌诊断的敏感性、特异性及综合受试者工作特征曲线下面积。结果：按照纳入标准和排除标准进行筛选,符合条件的文献共4篇,均为随机对照研究,样本量共501例,统计结果显示,IL-8诊断卵巢癌的总的敏感性为71%(95%可信区间：64%-77%),总的特异度为85%(95%可信区间：80%-89%)、总的诊断优势比24.46(95%可信区间：9.52-62.83)及SROC AUC为0.8872±0.0227,Q指数为0.8178±0.0233。结论：IL-8对卵巢癌具有较高的临床诊断价值。第四章IL-8的表达与卵巢癌预后价值的Meta分析目的：用Meta分析(meta-analysis)的方法对国内外资料进行统计学分析,评价IL-8在评估卵巢癌预后的价值.方法：以Pubmet、Medline为英文文献主要来源,以中国生物医学文献数据库、万方中文期刊数据库为中文文献主要来源,搜索1995年以来国内外公开发表的IL-8关于卵巢癌预后的文献；按Meta分析的要求和预后性试验公认的质量标准确定纳入和排除标准,对搜索到的文献进行质量评价,根据纳入标准和排除标准确定纳入Meta分析的文献,以汇总的方法计算出IL-8评估卵巢癌预后的风险比(HR)、及风险比的C195%。结果：3篇文献符合要求,包括患者人数共313个。对卵巢癌患者总生存率合并风险比(HR)值为2.83[1.24-6.47](P<0.05),无疾病进展生存率合并HR值为2.32[1.65-3.25](P<0.05)。结论：IL-8可能是卵巢癌患者总生存率、无疾病进展生存率的独立预后因素。第五章白介素8(IL-8)的生物信息学分析目的：采用生物信息学的方法,在获得白介素8(IL-8)基因和蛋白序列的基础上,对其结构、性质以及与其有相互作用的蛋白进行初步的生物信息学分析。方法：从NCBI、 EMBL、Ensembl、pfam、EBI、GeneCards、RCSB PDB、STRING等生物数据库检索出IL-8基因的相关信息,用Clustal2.0软件对IL-8蛋白进行基因比对,并用MEGA5.02软件做同源树。结果：分析IL-8基因和蛋白的特点、理化性质及与其存在相互作用的蛋白质等信息,从而为研究IL-8在不同条件下的功能以及信号转导调节中的作用提供必需的信息。结论：人IL-8有7种亚型,其基因与猩猩的白介素8基因具有同源性,但可信度不高,为66%,可以与MMP9、CXCR1、CXCR2、FOS、JUN、EGFR、RELA、DARC、DIF、IL-1B相互作用。