矮牵牛STMADS11和FLC亚家族基因克隆及功能分析

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矮牵牛(Petunia hybrida)是茄科矮牵牛属花卉,多年生常做一年生栽培,被广泛用于城市园林绿化,同时又是分子生物学研究的模式植物之一。MADS-box基因广泛存在于植物中,其编码的转录因子在植物生长发育的各个阶段发挥重要作用。目前,矮牵牛中MADS-box基因家族的研究主要集中在ABCDE类基因,其它大部分亚家族基因功能尚不明确。STMADS11和FLC类基因是MADS-box家族的两个亚家族,其中STMADS11亚家族主要与营养生长和开花时间调控有关,而FLC亚家族主要与春化作用有关,但在除拟南芥等模式植物以外的大多数物种中其功能仍然不清晰。本课题主要研究矮牵牛STMADS11和FLC亚家族基因的功能,通过克隆STMADS11亚家族的FBP13、FBP25和FLC亚家族的PMADS6、PMADS15、PMADS17,分别构建超表载体和RNAi载体,转化矮牵牛,获得转基因植物并进行表型观测,从而鉴定基因功能。主要研究结果如下:(1)从矮牵牛全基因组数据库中获取基因序列信息,设计特异引物,以野生型矮牵牛W115 c DNA为模板,扩增FBP13、FBP25、PMADS6、PMADS15、PMADS17基因,并构建超表载体和干涉载体。(2)构建FBP13、FBP25、PMADS6、PMADS15、PMADS17五个基因的超表载体和干涉载体,转化矮牵牛W115,获得转化苗,其中各个载体的转化苗数量如下:PMADS6、PMADS15、PMADS17、FBP13、FBP25超量表达转基因植株株数分别为4、15、5、10和6株;PMADS6、PMADS15、PMADS17、FBP13、FBP25干涉载体转基因植株株数分别为10、11、19、9和14株。(3)转基因植株表型观测结果发现,FBP13基因超量表达植株在幼苗期生长旺盛,并且分支增多;PMADS15超表植株也表现为营养生长旺盛。其它载体转基因植株尚未观测到明显表型。
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