论文部分内容阅读
目的探讨促智药奥拉西坦对小鼠脑创伤的脑保护作用及其作用机制。方法选取成年清洁级昆明小鼠120只,运用随机数字标记法分为假手术组(Sham),模型组(TBI),奥拉西坦治疗组(ORC),假手术组正常饲养仅做头皮切开处理,模型组采用Marmarous动物模型,治疗组在模型组的基础上分别在第3d、7d、14d进行奥拉西坦药物的干预(100 mg/kg-1/d)。Morris水迷宫、旷场实验观察动物运动神经功能评分以及认知功能的改变,HE染色检测脑部海马区神经元细胞形态的变化,ATP酶水平的变化评估线粒体功能,Western-blot法检测海马组织NMDAR1、Stau2蛋白表达的变化。结果Marmarous动物模型假手术组小鼠神经功能评分均为24分,模型组小鼠神经功能评分在6-10分之间,奥拉西坦治疗组小鼠神经功能评分在10-15分之间;同假手术组相比,模型组小鼠在第3d、7d、14d出现了肌肉震颤、抓取无力等表现,致使功能学评分处于低档水平,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,在第3d、7d、14d奥拉西坦治疗组小鼠运动功能得到了一定提升,差异具有统计学意义(P<0.05)。与假手术组比较,模型组脑组织Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活性在第3d、7d、14d显著降低;与模型组比较,在第3d、7d、14d奥拉西坦给药组脑组织ATP酶活性均明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。HE染色结果显示,假手术组脑组织细胞间隙正常,呈有序规则排列,胞核形状规则圆润,核仁染色正常,没有发现不规则侵袭扩张以及炎性浸润损伤;模型组脑组织细胞在第3d时,间隙变宽,细胞排列紊乱,核仁染色变深,炎性细胞浸润扩张;尤其是在第7d时,细胞水肿严重,空泡增加,提示脑水肿病变严重;在第14d时,细胞水肿减轻,但是炎性细胞浸润扩张仍然存在;奥拉西坦治疗组在第3d,7d,14d与模型组相比,可见水肿减轻,细胞膜皱缩减轻,并且随着时间的增加、给药次数的增加,奥拉西坦治疗组的细胞形态逐渐恢复。Western-blot法检测结果显示,与假手术组相比,模型组小鼠在第3d、7d、14d NMDAR1蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组相比,在第3d、7d、14d奥拉西坦治疗组NMDAR1蛋白明显降低(P<0.05)。Western-blot法检测结果显示,第3d、7d、14d奥拉西坦治疗组Stau2蛋白的表达较模型组增高(P<0.05);与假手术组比较,第3d、7d、14d模型组Stau2蛋白表达降低(P<0.05)。小鼠脑组织含水量检测结果显示,与假手术组相比,模型组小鼠脑组织水含量在第3d、7d、14d均高于模型组,且随时间的增加而增高(P<0.05);模型组小鼠脑组织水含量在7d达到顶峰,明显高于假手术组(P<0.05),这说明脑创伤后小鼠脑组织出现了明显的脑水肿;与模型组相比,奥拉西坦治疗组小鼠脑组织水含量在时间点第3d、7d均低于模型组(P<0.05)。旷场实验结果显示模型组实验小鼠在伤后第3d、7d、14d行走的总路程较假手术组相比减少(P<0.05);奥拉西坦治疗组实验小鼠行走的总路程与模型组相比相对增加,结果具有统计学意义(P<0.05)。水迷宫结果显示,模型组在伤后第3d、7d、14d搜索安全岛潜伏期的时间明显比假手术组增加,差异有统计学意义(P<0.05);奥拉西坦治疗组在伤后第3d、7d、14d搜索安全岛的时间潜伏期与模型组相比有显著的缩短,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论奥拉西坦对创伤后小鼠具有脑保护作用;可能通过降低海马NMDAR1的表达、上调Stau2蛋白的表达对脑创伤后小鼠发挥脑保护作用。图9幅;表8个;参76篇。