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蚂蟥((Whitmania pigra Whitman),又称宽体金线蛭,在分类上隶属于环节动物门(Annelida)蛭纲(Hirudinea)无吻蛭目黄蛭科(Haemo pidae),其干燥全体为药材水蛭,具有活血化瘀的功效,是目前治疗心脑血管疾病的主要药材,也是我国水蛭药材市场的主流品种。随着市场对水蛭的巨大需求以及环境污染日益加重,其野生资源几近枯竭,人工养殖应运而生并取得初步成功,但对于蚂蟥的消化和生殖方面的研究较少,本文主要对蚂蟥不同发育阶段消化道组织学、组织化学、酶活性以及生殖器官进行研究,旨在揭示蚂蟥消化道和生殖器官的发育过程,为蚂蟥基础生物学研究和人工繁育提供理论基础和科学指导。研究结果如下:(1)利用石蜡切片、H.E及AB-PAS染色法研究不同月龄蚂蟥口器组织结构的变化。结果显示:1-3月龄口径与口宽增加幅度较小,分别为0.6 mm.0.3 mm;3-4月龄增幅最大,为1.2 mm;4-6月龄口径、口宽达到最大值,基本不再增加。口唇位于口部最前端的外缘,外被一层薄护膜,随着生长口膜上皮细胞由立方上皮细胞到柱状细胞再到长柱状细胞。口腔深处共有颚3个,较大一个居背面,另外两个较小的分居左右腹侧,与肌肉质的咽相连,颚从外到内由角质层、上皮细胞层、肌层、颚腔组成,颚上均存在具有分泌酸性颗粒的乳突,从2月龄开始存在大量酸性颗粒状物质;口腔由内向外由粘膜层、粘膜下层、肌层组成,周围有着丰富的围口神经。咽由内向外由粘膜层、肌层、浆膜层构成,粘膜褶皱随生长增高增厚,粘膜上皮由复扁平上皮变为柱状上皮,肌层发达且随着生长逐渐增厚,4月龄厚度最大。蚂蟥粘液细胞由管状、梨状2种形态4种着色类型构成,不同时期AB-PAS染色变化不大,口唇1月龄粘液细胞少,2、3月龄粘液细胞增多且主要为II型粘液细胞,口腔中含有较多I型粘液腺细胞,咽部肌层下的结缔组织层分布着较少的II型粘液细胞。(2)利用组织切片和光镜技术对不同月龄蚂蟥消化道进行观察.结果表明,初孵出的蚂蟥消化道各部分已分化完全,但功能并不完善,1-2月龄属于蚂蟥消化道发育阶段,2-3月龄消化道发育趋于完善,4月龄消化道发育基本成熟。消化道发育的显著特征为消化道单层立方上皮细胞、矮柱状细胞、高柱状细胞的转变,消化道粘膜皱襞的丰度和高度以及粘液细胞数量的不断增加。研究发现消化道各消化器官组织结构与其生理功能密切相关。(3)分析并测定了不同月龄的蚂蟥消化道中淀粉酶、脂肪酶和酸、碱性蛋白酶的活力变化。结果表明,1-2月龄酸性蛋白酶活力变化不大,维持在较低水平,从2月龄开始酸性蛋白酶活性急剧升高,到2.5月龄达到最大值,之后快速下降;碱性蛋白酶1-2月龄酶活性保持较低水平,从2月龄开始逐渐增大,2.5月龄达到最大值,3月龄有一个小高峰,之后呈下降趋势;淀粉酶的活力逐渐升高,3月龄时达到最大值;脂肪酶从1月龄到1.5月龄逐渐下降,从1.5月龄至3月龄上升达最高峰值,4月龄有一个小高峰后再下降。蚂蟥2.5-3月龄时消化道蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性最强。(4)利用酶组织化学方法对蚂蟥不同时期消化道不同部位碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)、非特异性酯酶(NSE)、脂酶(Lipase)的分布进行了研究。结果表明:除直肠外,消化道各部均检出碱性磷酸酶活性,随着发育酶活性逐渐增强,各部分酶活性有显著差异(嗉囊>肠>食管>第6侧盲囊),碱性磷酸酶主要集中分布在粘膜上皮及纹状缘附近;酸性磷酸酶活性随着发育酶活力逐渐增强,各部分酶活性强弱表现为(肠>嗉囊>直肠>食管>第6侧盲囊),主要分布在纹状缘、粘膜上皮以及固有层中;非特异性酯酶随着发育呈现明显的上升趋势,各部分酶活性大小为嗉囊>肠>第6侧盲囊、食管>直肠,主要分布在粘膜上皮、纹状缘以及粘膜下层;不同发育阶段蚂蟥消化道各部位脂酶活性的变化存在差异,食管为先升高后降低,嗉囊先降低再升高,肠部及直肠基本呈现上升趋势,第6侧盲囊表现为先降低再上升而后又下降的趋势,各部分酶活性强弱表现为(嗉囊>肠>直肠>食管>第6侧盲囊),主要分布在粘膜上皮中。结论:随着蚂蟥的发育,各消化酶活性逐渐增强,而嗉囊(除第6侧盲囊外)和肠部是蚂蟥消化吸收的主要部位,第6侧盲囊主要功能为存储食物;消化道粘膜上皮为酶颗粒分布的主要部位。(5)采用组织解剖观察了蚂蟥生殖系统及其生殖细胞的发生过程。研究结果表明,蚂蟥为雌雄同体,雄性生殖系统主要由精巢、贮精囊、射精球、输卵管、阴茎囊等构成。根据精细胞和卵细胞的发育情况,将精巢和卵巢分为增殖期、生长期、成熟期、排放期和退化期5个时期,根据生殖细胞的大小、形状和分发特征,将精细胞的发生过程分为精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精细胞和精子5个发育阶段;卵母细胞分为卵原细胞期、无卵黄期、卵黄形成期、胶膜形成期。蚂蟥生殖腺及生殖细胞的发育不同步,精巢的发育早于卵巢,当卵巢仅为原始生殖细胞团时,精巢已经初步具备了完整的形态,精子出现的时间亦早于初级卵母细胞。