文冠果果实同化物韧皮部卸载路径研究

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文冠果(Xanthoceras sorbrifolia Bunge)被称为“北方油茶”,其种子含油率高,适应性广,易繁殖,作为一种具有发展潜力的生物能源物种,近年来受到人们广泛关注。产量低下是限制文冠果产业发展的主要因素,同化物转运和分配关系着果实的产量,而关于文冠果果实同化物韧皮部卸载的机制尚不清楚。本研究通过透射电镜观察了文冠果果实韧皮部超微结构的变化;同时利用荧光染料示踪技术和激光共聚焦扫描显微镜形象地再现同化物的卸载路径;测定了文冠果果实发育过程中可溶性糖、可溶性淀粉、可溶性蛋白和油脂等有机物含量的变化以及糖代谢相关酶酶活性的变化;利用Illumina Hi-seqTM2000高通量测序平台对文冠果果实进行转录组测序,获得大量基因序列;通过半定量PCR和实时荧光定量PCR实验筛选参与文冠果果实同化物卸载的糖转运蛋白基因。研究结果表明:1:观察文冠果果实不同发育时期超微结构显示,发育前期和后期筛管伴胞复合体(SE-CC)与周围薄壁细胞(PP)间均存在胞间连丝,形成了共质体联系,而发育中期则没有胞间连丝,存在共质体隔离。荧光染料示踪结果表明,发育前期和后期膜不透性荧光染料羧基荧光素(CF)可以卸出到周围薄壁细胞,发育中期则被限制在维管束中。文冠果果实发育过程中同化物卸载途径发生了共质体—质外体—共质体的变化。2:通过对文冠果发育过程中果皮和种子中的有机物含量变化的研究,果皮中的蛋白质、淀粉和可溶性糖等有机物会在油脂快速合成期转移到种子中,和种子中淀粉、蛋白和可溶性糖等有机物一起转变为油脂来储存。糖代谢相关酶的净活性变化验证了这一过程,也与卸载路径的转变相吻合。3:利用高通量测序对文冠果果实进行转录组测序,共获得68 298个Unigene序列,其中包含5个SUT基因以及3个SWEET基因,通过半定量和实时荧光定量PCR实验推测SUT3和SWEET10等2个糖转运蛋白基因可能参与了文冠果果实韧皮部卸载。
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