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肿节风具有抗氧化、抑菌、抗肿瘤和抗炎等多种生物活性,是一种极具开发潜力的中药材。已有文献报道肿节风抗氧化、抗肿瘤作用较多,但是同时从细胞水平和分子水平来研究其抗肿瘤作用的报到较少。因此本研究以肿节风(Sarcandraglabra(Thunb.) Nakai)为材料,探讨不同极性的提取物的抗氧化活性并初步探究抗肿瘤活性机制。研究结果表明: (1)不同提取溶剂提取肿节风的总黄酮含量分别为:乙酸乙酯>95%乙醇>石油醚>正丁醇>水。 (2)分别采用DPPH·、ABTS、FRAP法评价肿节风各提取物抗氧化活性,结果表明,乙酸乙酯相清除DPPH·自由基和还原Fe3+能力最强,分别与6.73μg/mL VC、0.68mg/mL FeSO4当量一致。 (3)分别用不同浓度的乙酸乙酯相提取物处理宫颈癌Hela细胞和黑色素瘤A375细胞,应用MTT法测定48h后细胞的存活率,结果发现:药物浓度与对细胞的抑制作用呈正相关,提取物浓度达到100μg/mL时,对Hela和A375的抑制率分别为51.28%和66.87%。倒置显微镜、H.E染色法、AO/EB荧光染色观察药物处理后细胞形态的变化发现,与对照相比,细胞周围黑色沉淀逐渐增多,细胞间的接触减少,细胞开始裂解、缩小,细胞完整性破坏;荧光染色中也同样发现,处理组随着药物浓度的增加,越来越多的凋亡细胞被EB染色,发出橙色或橙红色荧光。 (4)采用qPCR法检测肿节风乙酸乙酯相提取物处理Hela和A375细胞48h后凋亡相关基因p53、Bcl-2、Bax的表达量,结果表明,p53基因表达上调,Bcl-2/Bax的表达比率出现下调,经过细胞信号转导途径逐步放大,诱导肿瘤细胞凋亡。 (5)对肿节风乙酸乙酯相处理后的Hela和A375细胞的转录组基因表达谱分析,结果表明,在A375细胞中有752个基因表达在加药后出现下调,735个基因表达在加药后出现上调,信号通路分析表明其主要通过抑制肿瘤细胞迁移扩散而诱导细胞凋亡。Hela细胞中110个基因表达在加药后出现下调,有408个基因表达在加药后出现上调,信号通路分析表明其主要通过影响p53和MAPK信号通路诱导凋亡。