干扰RNA抑制猪瘟病毒增殖效果研究

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本实验首先研究了猪瘟病毒shimen 株在PK-15 细胞中的增殖特点。用体外转录和质粒表达两种方式,获得了针对猪瘟病毒不同基因的小干扰RNA,导入细胞后检测干扰RNA 对猪瘟病毒的抑制效果,结果表明siN1、siN2 和si5B1 分别有效地抑制了猪瘟病毒的增殖。筛选得到对猪瘟病毒增殖具有高效抑制作用的shRNA 重组表达质粒N1、N2、N3、S6、S2、S7、S11、5B1、S10 和S12。通过向家兔注射在体外转录的siRNA:siCtrl、siN1 和siN2 和shRNA 表达质粒H1-Ctrl、N1 和N2,攻毒结果显示:注射干扰RNA siN1 和siN2 和shRNA 表达质粒的家兔出现发热反应的时间比对照组晚18-24 h,比对照组少18 h。ID50 测定结果表明siN1、siN2 和N1、N2 有效抑制了猪瘟病毒HCLV 增殖。
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