蒜头果组培微繁体系的建立及细胞悬浮培养技术研究

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本论文系统地论述了蒜头果的微繁体系和细胞悬浮培养技术,建立了蒜头果微繁体系并优化了蒜头果细胞悬浮培养的培养条件,为蒜头果的人工微繁及利用悬浮培养技术来获取其有效成份的研究提供了参考依据,试验结果如下:1、外植体茎段的最佳灭菌组合是:70%酒精15s+10%NaClO 12min+0.1%HgCl28min;种仁的最佳灭菌组合是:70%酒精30s+12%NaClO 10min+0.1%HgCl230min。2、五种基本培养基(MS、1/2MS、B5、Whiter和Miller)的试验结果表明,MS培养基适宜蒜头果种胚无菌苗的诱导。3、不定芽直接分化途径可作为获取组织培养苗的主要途径。4、GA3能促进芽的继代增殖生长。5、无菌苗下胚轴愈伤组织诱导的最适培养基为:MS+2,4-D1.5mg·L-1+6-BA0.6 mg·L-1+NAA1.0mg·L-1,诱导率达100%。6、蒜头果试管苗较佳的移栽基质是河沙,40d移栽成活率可达86.67%。7、胚乳愈伤组织诱导的最适培养基为:MS+2,4-D2.0 mg·L-1+KT 0.2mg·L-1+6-BA0.4 mg·L-1+GA30.4 mg·L-1,诱导率达100%。8、胚乳愈伤组织增殖的最适培养基为:MS+2,4-D 1.0 mg·L-1+6-BA0.3mg·L-1+GA30.3 mg·L-1,增殖倍数达2.17倍。9、愈伤组织继代增殖分化能力较强的是前2代,增殖倍数都能达2倍以上。10、蒜头果胚乳愈伤组织悬浮培养的最佳条件为:基本培养基为MS,接种量和培养液的比例为6g:200ml,pH6.0,蔗糖为碳源,蔗糖浓度40g·L-1,摇床转速110 r/min。培养20天后,培养液中二十四碳-15-烯酸的含量达2.9g·L-1
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