论文部分内容阅读
目的: 1.研究Wnt信号通路调控因子Pygo2在肝癌、癌旁组织及肝癌细胞系中的表达水平,评价Pygo2在肝癌中的预后价值; 2.研究下调 Pygo2表达对肝癌细胞生长、增殖等细胞生物学的影响,初步探索Pygo2通过影响Wnt/β-catenin信号通路靶基因表达参与肝癌发生发展的机制。 3.研究炎症因子IL-22与Pygo2的相关性及在诊断肝癌复发中的应用价值。 方法: 1.利用Real-time PCR、免疫组化检测肝癌、癌旁组织中Pygo2的表达情况,利用Western blot检测5种不同侵袭转移潜能肝癌细胞系中Pygo2的表达情况,利用统计学方法分析Pygo2的不同表达水平与原发性肝癌患者预后的相关性; 2.利用shRNA技术建立Pygo2表达下调的肝癌细胞系SK-Hep1、Hep3B,分别采用CCK-8法细胞活性实验、平板克隆形成实验、裸鼠体外荷瘤实验、免疫组化、Real-time PCR、双荧光素酶报告基因的方法研究 Pygo2表达下调对肝癌细胞生长、增殖等细胞生物学特性的影响并初步探索Pygo2通过影响Wnt/β-catenin信号通路靶基因表达参与肝癌发生发展的机制。 结果: 1.从转录水平、蛋白水平证实Pygo2表达在肝癌组织中较癌旁组织明显增高(P<0.01);Pygo2表达与肝癌细胞系侵袭转移潜能呈正相关;Pygo2表达与肝癌患者预后呈负相关(P<0.05)。 2.通过生长、增殖、克隆形成、裸鼠荷瘤等实验发现,与对照组相比,Pygo2表达下调后肝癌细胞系生长、增殖和成瘤能力明显减弱;通过双荧光素酶报告基因检测、Real-time PCR发现,Pygo2表达下调后Wnt/β-catenin信号通路靶基因表达降低,尤以c-myc为甚,在mRNA水平Pygo2与c-myc呈正相关。 3.肝癌复发患者血清中IL-22水平与Pygo2表达量呈正相关,肝癌复发组患者血清IL-22水平明显增高。 结论: 1. Pygo2在肝癌中表达显著,在肝癌的诊断与治疗中具有潜在应用价值。 2. Pygo2可能通过影响 Wnt/β-catenin信号通路靶基因的表达在肝癌的发生发展中具有重要作用。 3. IL-22是肝癌复发的独立危险因素