抗癌药用植物喜树内生真菌NXZ-05菌株的次级代谢产物研究

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近年来植物内生真菌已经成为研究活性天然产物的重要资源,并已从中分离出大量具有生理活性的化合物,由于其生境独特,很可能产生一些具有独特化学结构的次级代谢产物,从中发现与现有药物不同的新的活性物质,成为治疗肿瘤、感染、老年痴呆等顽疾的药物前体。喜树,为我国特有的药用植物,可以产生具有明显抗肿瘤活性的生物碱――喜树碱。在喜树组织――一个如此特殊的生境中,有可能存在特殊的内生真菌。此外,喜树内生真菌有可能在喜树碱的合成或转化中扮演着重要的角色。因此,我们有必要对喜树内生真菌的活性代谢产物进行研究。本文对分离自喜树枝条的内生真菌NXZ-05的次级代谢产物进行了研究。菌株NXZ-05经过ITS分子鉴定,确定为拟茎点霉Phomopsis(Sacc.) Bubak。以PDA, Czapek及GPY为培养基,对菌株NXZ-05进行培养基选择后,选择PDA进行琼脂表面发酵,对其次级代谢产物展开了初步的研究,从中分离到8个纯化合物。经过结构解析,确定T1为multiplolide A , T3为8-O-acetyl 5,6-dihydro-5,6-epoxymultiplotide A,T5为8-O-acetyl multipolide A,T13为5,6-dihydro-5,6-epoxymultiplotide A,T17为3,4-deoxy-3,4-did ehydromultiplod- ide A,它们均属于十元环内酯类化合物;T30为methyl (4E)-6,7,9-trihydr oxy-4-decenoate,T31为(4E)-6,7,9-trihydroxy-4-decenoic acid,T30,T31属于不饱和脂肪酸类化合物;T20为过氧麦角甾醇。经过CA检索,除A1和T20外,其余化合物T3,T5,T13,T17,T30,T31为新化合物。对分离到的8个纯化合物进行了乙酰胆碱酯酶抑制活性、抗菌、抗肿瘤、抗氧化等生理活性测试。T5具有显著的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其IC50为5.7μmol/L,稍弱于AD治疗药物加兰他敏;此外,T5没有明显的细胞毒性。T1,T3,T5,T13对结核分支杆菌有较好的抗菌活性,它们对该菌株的MIC均为25μg/mL;但是,对其它试验指示菌――白色假丝酵母、啤酒酵母、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌却没有明显的抗菌活性。T1和T20具有一定的抗肿瘤活性,T1对细胞株Raji的IC50为0.5μmol/mL,T20对Hela的IC50为0.1μmol/mL。上述化合物均没有抗氧化活性。本文还以GPY、YES、GPM、PD及Sabouraud为培养基,对菌株NXZ-05进行少量液体发酵,比较上述5种培养基的发酵产物,发现GPY的胞外产物具有显著的抗肿瘤活性。本文的研究结果表明,菌株NXZ-05具有较好的生理活性,其次级代谢产物中有一系列化学结构新颖的化合物,有继续研究的意义。化合物T5有潜力成为新型的AD治疗药物前体。
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