循环内皮细胞的培养及人工血管内皮化的实验研究

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第一部分 脐血内皮细胞及人工血管内皮化的研究 研究生 王毅 导师 陈易人 戴坤扬 目的:寻找来源方便的内皮细胞,解决人工血管内皮化问题。方法:收集胎儿脐血Ficoll离心获得单核细胞,置于内皮细胞培养液中,诱导内皮细胞祖细胞转化为内皮细胞并扩增:作光镜、扫描电镜形态学观察,免疫细胞化学定性、流式细胞仪定量测定;采用细胞旋转贴壁培养生长法,使内皮细胞衬里人工血管腔面。结果:1、脐血内皮细胞祖细胞在培养第五天,细胞扩增3.6±1.7倍,并开始转化为内皮细胞,在以后的二周内保持增殖。2、免疫细胞化学检测显示:内皮细胞培养早期,Ⅷ因子、CD34、CD31、VEGFR-2表达均为阳性,后期除Ⅷ因子有较高表达外,其他指标表达阴性。3、形态学观察:在普通玻璃培养瓶中,内皮细胞呈梭形、单层贴壁生长;应用细胞原为旋转贴壁生长法,内皮细胞呈片状生长贴壁于人工血管内壁,能达到内皮化要求。结论:循环内皮细胞能在体外诱导培养并扩增,可作为人工血管内皮化研究,有望应用于临床。 第二部分 骨髓内皮细胞衬里人工血管间置移植动物实验 研究生 王毅 导师 陈易人 戴坤扬 目的:通过骨髓内皮细胞内皮化人工血管间置移植的动物实验,确立
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