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背景:肝门部胆管癌预后仍然不佳。肝门部胆管癌总体切除率低于40%。术后1,3,5年存活率大约为80%,50%和40%。肝移植术后1,3,5年存活率也仅为60%,40%和30%。60%以上的肝门部胆管癌患者不得不接受姑息性内或外引流术以缓解黄疸。外科胆道引流是姑息性治疗肝门部胆管癌主要方法之一,其方法之一就是经过肿瘤于胆道内放置支撑管。射频消融因具有操作简单、微创、并发症少和可重复使用而应用于多种不能切除的恶性肿瘤。然而,目前尚未发现有关胆管腔内射频消融治疗肝门部胆管癌的报道。如果在胆道放置支撑管之前,能经胆管腔内将射频消融应用于肝门部胆管癌的治疗,则必将有助于不能切除的肝门部胆管癌患者。本研究的目的就是通过离体和活体实验研究,为临床应用射频消融治疗不能切除的肝门部胆管癌提供依据。第一部分:肝门部胆管腔内射频消融后胆管和肝组织病理学变化离体实验研究目的观察肝门部胆管腔内射频消融后胆管和肝组织病理学变化并探讨电极针裸露部分长度、输出功率和消融时间与凝固区大小的关系。材料和方法按照单极电极针裸露部分(裸露电极针)长度、输出功率和消融时间组合将20个新鲜离体猪肝的48个肝门部胆管靶点平均分为4组。将裸露电极针置入肝门部胆管腔内进行射频消融。检测凝固区剖面大小并光镜下病理学观察。结果凝固区剖面观可见以胆管为长轴、胆管壁和邻近肝组织为短轴的半椭圆形灰白色凝固区。胆管壁完整。光镜下凝固区内胆管粘膜和粘膜下层坏死,肝组织变性。裸露电极针13mm,输出功率5W,消融时间分别为2min、4min时,凝固区平均长轴直径分别为(16.92±1.62)mm、(16.83±1.90)mm,相差不显著(P>0.05),平均短轴直径分别为(4.08±0.67)mm,(6.50±1.08)mm,相差显著(P<0.05);裸露电极针13mm,消融时间2min,输出功率分别为5W、10W时,凝固区平均长轴直径分别为(16.92±1.62)mm、(16.08±1.62)mm ,相差不显著(P>0.05) ,平均短轴直径分别为(4.08±0.67)mm ,(6.08±1.24)mm,相差显著(P<0.05);输出功率5W,消融时间4min,裸露电极针分别为13mm,9mm时,凝固灶平均长轴直径分别为(16.83±1.90)mm,(13.25±1.14)mm,相差显著(P<0.05),平均短轴直径分别为(6.50±1.08)mm,(6.17±1.19)mm,相差不显著(P>0.05)。结论肝门部胆管腔内射频消融可形成凝固区。裸露电极针长度决定凝固区长轴直径,输出功率或消融时间决定凝固区短轴直径。第二部分:阻断肝门对肝门部胆管腔内射频消融影响活体实验研究目的观察活体时肝门部胆管腔内射频消融能否形成凝固区并探讨肝门部血流对凝固区大小的影响材料和方法对6头健康家猪通过全麻下剖腹手术选取14个肝门部胆管靶点,随机分为非肝门阻断组和肝门阻断组,每组7个胆管靶点。将单极电极针13mm长裸露部分置入胆管腔内。在输出功率5W,消融时间4min时进行射频消融。大体观察胆管靶点处胆管和邻近肝组织病理学变化,测量凝固区大小并光镜下病理学检查。结果两组剖面观均可见半椭圆形凝固区。两组凝固区周围都有明显的暗红色环状带。光镜下两组凝固区胆管粘膜和粘膜下层坏死,肝组织变性。暗红色环状带光镜下为肝组织出血。非肝门阻断组和肝门阻断组凝固区平均长轴直径依次为(13.29±1.38)mm、(13.29±1.11)mm,差异不显著(P>0.05);非肝门阻断组和肝门阻断组凝固区平均短轴直径依次为(3.14±1.07)mm、(4.57±0.98)mm,差异显著(P<0.05)。结论活体时肝门部胆管腔内射频消融可形成典型的射频消融区。肝门部血流影响凝固区短轴直径,不影响长轴直径。无论是否阻断第一肝门,凝固区长轴直径都与电极针裸露部分长度一致。第三部分:肝门部胆管腔内射频消融后相关并发症活体实验观察目的观察肝门部胆管腔内射频消融相关并发症和消融区组织病理学转归。材料和方法将14条健康狗随机分为2组,每组7条狗。在全麻下通过剖腹手术,在每条狗肝门部选择1～2个胆管靶点。将单极电极针13mm长裸露部分置入胆管腔内进行射频消融。第Ⅰ组输出功率10W,消融时间4min;第Ⅱ组输出功率5W,消融时间8min。每组于消融后3天各处死2条狗,9天各处死1条狗,14天各处死4条狗。观察射频消融相关并发症:射频消融所致胆汁漏、胆道结石形成、肝动脉血栓形成、门静脉血栓形成、下腔静脉血栓形成、肝静脉血栓形成。大体和光学显微镜观察射频消融区病理转归。结果1条狗发生门静脉、肝静脉和下腔静脉血栓形成。1条狗发生胆管结石。所有狗无肝动脉血栓形成。没有发生射频消融所致胆汁漏。射频消融后3天时,凝固区内胆管粘膜层和粘膜下层以及肝组织明显坏死。射频消融后9天时,凝固区内胆管粘膜层和粘膜下层以及肝组织有炎细胞侵润和部分纤维化。射频消融后14天时,凝固区内胆管壁和肝组织明显纤维化。结论肝门部胆管腔内射频消融相关并发症极少发生。消融区内胆管粘膜层和粘膜下层以及肝组织坏死、炎症细胞侵润并逐渐纤维化。