论文部分内容阅读
第一部分乙肝后肝硬化和肝癌患者肝组织中雌激素及其代谢产物含量的对比研究
背景:以往研究表明雌激素对肝脏具有保护作用,其与肝脏疾病的发展乃至肿瘤的发生都有密切关系,病理状态下肝组织内雌激素的代谢方式和类型的改变目前仍未见报道。
目的:测定乙肝后肝硬化和肝癌患者肝组织中雌激素及其代谢产物含量并进行对比,研究乙肝后肝硬化和肝癌患者肝组织中雌激素的代谢方式及类型的变化。
方法：采用随机、对照的研究方法自2007年10月～2009年5月间收集于我院行择期肝移植手术患者的肝脏组织。A组为正常肝组织对照组(n=3),B组为乙肝后肝硬化患者组(n=7),C组为肝癌患者组(n=8),D组为肝移植术后肝癌复发行择期肝部分切除术患者组(n=4)。用Elisa法检测各组肝组织内雌酮(E1)、硫酸雌酮(E1S)、雌二醇(E2)、硫酸雌二醇(E2S)、葡萄糖醛酸雌二醇(E2G)的浓度,并计算代谢转化产物浓度占底物浓度的百分比。
结果：硫酸雌二醇(E2S)的含量稳定在总雌二醇含量的20％。相关分析显示,游离雌二醇占雌二醇总量的比值(r=0.54)、硫酸雌二醇(E2S)(r=0.87)、硫酸雌二醇占雌二醇总量的比值(r=0.66)和葡萄糖醛酸雌二醇(E2G)占雌二醇总量的比值(r=-0.72)与游离雌二醇(E2)之间显著性相关(P<0.001)。硫酸雌二醇(E2S)与硫酸雌二醇占雌二醇总量的比值呈正相关(r=0.84,P<0.001)；葡萄糖醛酸雌二醇(E2G)占雌二醇总量的比值与游离雌二醇占雌二醇总量的比值呈负相关(r=-0.96,P<0.001)。另外,四组患者肝组织中游离雌酮的浓度,C组患者硫酸雌酮的浓度最高12.08+6.82ng/L,较A组正常人高56.5％,较B组乙肝肝硬化患者高14.7％,但差异均没有统计学意义(P>0.05)。雌二醇的结果显示B组、C组、D组患者雌二醇和硫酸雌二醇的浓度略低于A组,其差异没有统计学意义(P>0.05)。
结论：硫酸转移酶SULT1A1对雌二醇的代谢不受肝功能影响,始终以Ⅰ级代谢动力学方式,即以一个恒定比例将游离雌二醇进行硫酸化灭活；肝组织内游离雌二醇相对浓度升高可抑制Ⅰ相代谢酶CYP1A2的活性。
第二部分乙肝后肝硬化和肝癌患者肝组织中Ⅰ相、Ⅱ相代谢酶表达特征
背景:研究表明肝组织内与雌激素代谢相关的肝药酶有两类:Ⅰ相代谢酶类,细胞色素P450家族中的CYP1A2和CYP3A4；Ⅱ相代谢酶类,硫酸转移酶家族中的SULT1A1和SULT1E1。肝脏病理状态下肝组织内与雌激素代谢相关的肝药酶表达特征的改变目前仍未见报道。
目的:研究乙肝后肝硬化和肝癌患者肝组织中与雌激素代谢相关肝药酶类的蛋白含量和基因表达改变情况。
方法：采用随机、对照的研究方法自2007年10月～2009年5月间收集于我院行择期肝移植手术患者的肝脏组织。A组为正常肝组织对照组(n=3),B组为乙肝后肝硬化患者组(n=10),C组为肝癌患者组(n=9),D组为肝移植术后肝癌复发行择期肝部分切除术患者组(n=4)。分别用Westen Blot法和Realtime PCR法测量各组肝组织内胞色素P450家族中的CYP1A2和CYP3A4,以及硫酸转移酶家族中的SULT1A1和SULT1E1的蛋白含量及其mRNA表达量改变情况。
结果：肝组织中SULT1A1的蛋白含量,与正常肝组织组(A组)相比B组降低了35.0％(P<0.05),而C组升高了66.5％(P<0.05)；与B组相比C组蛋白含量升高了71.0％(P<0.05)。肝组织中SULT1E1的蛋白含量,与正常肝组织组(A组)相比B组降低了45.3％(P<0.05),而C组升高了25.0％(P<0.05)；与B组相比C组蛋白含量升了56.2％(P<0.05)。肝组织中CYP1A2的蛋白含量,与正常肝组织相比B组降低了43.0％(P<0.05),而C组升高了86.0％(P<0.05)；与B组相比C组升高了69.4％(P<0.05)。
肝组织中SULT1A1的mRNA表达,与正常肝组织相比B组的表达量降低了13.0％(P<0.05),而C组升高了11.6％(P<0.05)；与B组相比C组升高了28.3％(P<0.05)。肝组织中CYP1A2的表达,B、C、D组的表达量分别低于A组41.9％、13.9％、28.0％(P<0.05)；C组的表达量高于B组和D组(P<0.05)。肝微粒体中CYP3A4的表达,与A组相比B组降低了13.6％(P<0.05)。
结论：Ⅱ相代谢酶SULT1A1和SULT1E1在肝癌患者肝组织中的蛋白含量和mRNA表达量均较正常肝组织升高,也明显高于乙肝后肝硬化患者肝组织；乙肝后肝硬化患者的肝药酶的蛋白含量及其mRNA表达量均明显降低。
第三部分乙肝后肝硬化和肝癌患者肝组织中IL-6含量相关关系研究
背景:以往研究显示围术期肝脏损伤与炎症因子IL-1、IL-6和TNF-α介导的肝细胞炎症反应有关。动物实验表明雌激素对肝脏的保护作用是通过抑制Kupffer细胞分泌IL-6减轻肝脏炎性反应来实现,但在人体研究中还未见相关报道。
目的:测定乙肝后肝硬化和肝癌患者肝组织中IL-6含量,研究IL-6在乙肝病情进展过程中与肝脏保护的关系。
方法：采用随机、对照的研究方法自2007年10月～2009年5月间收集于我院行择期肝移植手术患者的肝脏组织。A组为正常肝组织对照组(n=3),B组为乙肝后肝硬化患者组(n=7),C组为肝癌患者组(n=8),D组为肝移植术后肝癌复发行择期肝部分切除术患者组(n=4)。将肝组织在液氮中磨碎后置入玻璃匀浆器制成肝匀浆,用Elisa法测量各组肝组织内IL-6的浓度,并将所得的肝组织中IL-6含量与雌激素含量和肝药酶mRNA表达量之间行相关分析。
结果：乙肝后肝硬化组(B组)患者IL-6的浓度较正常志愿者低49.2％(P<0.05)；而肝癌组(C组)患者IL-6的浓度是B组患者的2.7倍(P<0.05),且较正常志愿者高38.7％。相关分析结果显示:游离雌二醇(r=0.62)、游离雌二醇占雌二醇总量的比值(r=0.52)、硫酸雌二醇占雌二醇总量的比值(r=0.47)与肝组织内IL-6呈正相关(P<0.001)；葡萄糖醛酸雌二醇占雌二醇总量的比值与肝组织内IL-6呈负相关(r=-0.61,P<0.001),SULT1A1的表达量与肝组织内IL-6浓度呈正相关(r=0.54,P<0.001)；CYP1A2的表达量与肝组织内IL-6浓度呈负相关(r=-0.59,P<0.001)。
结论：肝癌患者肝组织内IL-6浓度高于正常肝组织也显著高于乙肝后肝硬化患者肝组织,SULT1A1的mRNA表达量增加时肝组织内IL-6含量相应增高,而CYP1A2的mRNA表达量增加时肝组织内IL-6含量则相应降低。