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目的:胃癌是人类消化系统常见的恶性肿瘤之一,在世界范围内其发病呈上升趋势。GLOBALCAN最新数据显示,2012年全球新发胃癌病例95.1万,发病率占全球恶性肿瘤第五位,死亡率为第三位,其中男女发病率之比为2-3:1。胃癌的发病机制尚未完全明确,目前公认是由多基因多因素参与、环境和遗传因素共同作用导致,而癌转移是造成其预后差的重要原因。Kiss-1基因最早在黑色素瘤细胞株中被发现,定位于染色体1q32-q41,编码1个亲水性蛋白、包含4个外显因子,其中亲水蛋白由145个氨基酸组成。研究证实,Kiss-1基因是多种恶性肿瘤的转移抑制基因,肿瘤的转移及预后与Kiss-1基因的表达下调关系密切。Notch基因的发现最早是在果蝇体内,其被首次克隆成功在1980年。目前,在哺乳动物中共发现4种Notch受体(Notchl、Notch2、Notch3和Notch4)。研究表明,Notchl与多种肿瘤有密切关系,在肿瘤的进展及转移中起重要的作用。目前,尚未阐明两个基因在胃癌发病过程中的作用。本文应用RT-q PCR(real-time quantitative reverse transcription-PCR,RT-q PCR)方法检测胃癌组织及癌旁正常组织中Kiss-1 m RNA和Notchl m RNA表达情况,并经过分析其与临床病理特征(分化程度、转移、分期、预后等)之间的关系,探讨其在胃癌发生发展过程中所起到的作用,为胃癌诊治提供新的思路。方法:1 2013年10月~2014年10月期间,河北医科大学第一医院经病理证实胃癌住院手术患者34例,其中男性22例,女性12例,年龄49-83岁(平均年龄66.06±9.18岁),采集标本前所有的患者均没有进行放疗、化疗,以及免疫治疗。收集患者性别、年龄、TNM分期、肿瘤位置、组织学类型、淋巴结状态、浸润深度、分化程度、远处转移等临床病理资料,登记建表并签署知情同意书。分组情况:胃癌组34例标本均取自手术切除的胃癌组织;正常对照组34例标本均取自距肿瘤边缘5cm及以上的正常胃黏膜组织。34例标本均在病理组织学诊断证实后最终选取。2 Trizo L法提取34例胃癌组织及34例癌旁正常组织中的总RNA。根据美国Gene Copoeia公司提供的反转录试剂盒操作说明书进行反转录。RT-q PCR检测癌组织及癌周边正常组织中的Kiss-1 m RNA、Notch1 m RNA的表达,引物购自美国Gene Copoeia公司,按说明书操作。反应条件:95℃预变性10 min,然后按95℃15s,60℃30s,72℃10s,进行40个循环,重复3次取平均值。本研究靶基因的表达量采用2-△CT表示,其中ΔCT为CT靶基因与CTGAPDH的差值。3统计学处理采用SPSS 16.0统计软件进行统计分析,数据以中位数(四分位数间距)表示,两组间配对样本采用Wilcoxon秩和检验,两组间独立样本采用Mann-Whitney U检验,均以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1 Kiss-1 m RNA在胃癌组中的表达较正常对照组显著降低,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。2 Kiss-1 m RNA在胃癌有淋巴结转移组、TNM分期III-IV期组中的表达显著低于无淋巴结转移组及TNM分期I-II期组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。3 Notch1 m RNA在胃癌组中的表达较正常组显著升高,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。4 Notch1 m RNA在胃癌有淋巴结转移组及TNM分期III-IV期组中的表达显著高于无淋巴结转移组及I-II期组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。5 Notch1 m RNA在胃癌低分化组的表达显著高于高分化组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。6 Kiss-1 m RNA与Notch1 m RNA的表达均与患者性别、年龄、病理类型等无明显相关性,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1 Kiss-1 m RNA在胃癌组织中的表达较癌旁正常组织显著下调,提示其在胃癌发病过程中可能发挥抑癌作用。2 Kiss-1 m RNA的表达与胃癌分期及转移密切相关,提示其可能通过抑制胃癌的转移来影响预后。3 Notch1 m RNA在胃癌组织中的表达较癌旁正常组织显著上调,提示其在胃癌发病过程中可能发挥促癌作用。4 Notch1 m RNA的表达与胃癌的分期、淋巴结转移及其分化程度密切相关,进一步提示Notch1 m RNA的高表达促进了胃癌进展,有潜力成为胃癌早期诊断的新型肿瘤标记物用于胃癌的早期诊断。