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本课题旨在以天然沸石为原料,通过阳离子交换反应,用甲酸来进行改性处理,并以此改性沸石做为试验材料,采用肉鸡体内、外试验相结合的方法来研究天然斜发沸石(NCLI)和改性沸石(MCLI)对沙门氏菌、大肠杆菌及其毒素的吸附特性,对受LPS攻击肉鸡的肠道保护效果和对动物健康与生产性能的影响。试验一:对酸化剂和沸石改性的最佳工艺条件进行探索,并研究了在最佳工艺条件下,沸石经酸改性后其结构和表征的变化。试验结果表明:用甲酸和磷酸改性沸石后,均可提高沸石的吸附能力,改变其表面形态,增加比表面积和孔体积,但其内部结构变化不大;甲酸改性沸石的效果要优于磷酸改性。试验二:模拟动物肠道环境(pH=7.0,温度37℃)考察沸石和甲酸改性沸石对鸡伤寒沙门氏菌K533(S.choleraesuis)、猪大肠杆菌K88(E.coli K88)、禽大肠杆菌(E.coli)和毒素的吸附及酸改沸石的杀菌情况,并研究了不同矿物浓度、菌液浓度、吸附时间、离子浓度和赖氨酸浓度对吸附和杀菌的影响。此外,并借助细菌胞外酶活性和革兰氏染色及电镜指标研究了其杀菌机理。试验结果表明:沸石和改性沸石对沙门氏菌、大肠杆菌和脂多糖有极强的吸附能力,矿物浓度为20-25mg/g时,吸附达到最大值,随后吸附能力则下降;在2h时达到吸附平衡;其吸附能力随菌液(或脂多糖)浓度增加而增加;赖氨酸浓度和离子浓度影响矿物对细菌的吸附;且改性沸石与细菌或毒素的矿物复合体解吸率较低;此外,沸石经改性后,具有很强的杀菌效果,其趋势同吸附规律相一致。其杀菌机理主要与其本身的吸附和改性后沸石所承载的H+作用有关。试验三:研究NCLI和MCLI对肉鸡生长发育、肠道黏膜结构、消化酶分泌、肠道发酵等的影响。选用240只1日龄AA肉鸡为试验对象,采用随机区组试验设计,随机分为3个处理,每个处理8个重复,分别饲喂基础日粮、基础日粮+2%NCLI、基础日粮+2%MCLI的试验日粮,研究天然沸石及改性沸石在肉鸡饲养中的应用效果。试验期42天。肉鸡在21和42日龄称重后屠宰,取相关内容物和组织样品进行指标测定。试验结果如下:对照组、NCLI组和MCLI组间肉鸡的体增重(BWG)、采食量(FI)和料重比(F/G)均无显著差异(P>0.05);NCLI和MCLI勺添加能使空肠、回肠的长度和重量增加,十二指肠的重量和长度减少;空肠、回肠绒毛高度(VH),绒毛高度与隐窝深度比值(V/C)在三个处理之间均差异显著(P<0.01);NCLI和MCLI的添加可提高全期肉鸡各肠道淀粉酶、脂肪酶(42d除外)和胰蛋白酶及小肠黏膜二糖酶的活性(P<0.01),其中以空肠的消化酶活性最高;此外,NCLI和MCLI能降低全期肉鸡肠道大肠杆菌(E. coli)数量(P<0.01),增加42d肉鸡肠道Lactobacillus的数量;降低小肠和盲肠的pH值(P<0.05或P<0.01)。试验四:研究NCLI和MCLI对LPS攻毒肉鸡生产性能、肠道发育、肠黏膜抗氧化功能,细胞免疫反应的影响及对炎性细胞因子表达的调控,并从基因和蛋白水平深入探讨NLCI和MCLI缓解免疫应激和抑制炎症反应的相关作用机制。选择288只1日龄的AA商品公鸡,进行2×3因子设计。试验因子包括免疫应激(口腔灌服大肠杆菌脂多糖(LPS)或生理盐水)和日粮类型(基础日粮、基础日粮+2%NCLI、基础日粮+2%MCLI)。每个处理6个重复,每个重复8只鸡。试验期21天。在试验的第16d,每日粮处理中一半的肉鸡口腔灌服250μg/kg BW的LPS,另一半灌服等量的生理盐水作为对照,在18d和20d按首次剂量在相同时间再次灌服。最后一次灌服后2-4h内宰杀。称其体重,取相关内容物和组织样品进行指标测定。试验结果表明:1.对肠黏膜屏障受损肉鸡的生产性能、肠道发育、免疫器官指数和肠道黏膜上皮细胞的影响。结果表明:(1)在接受LPS应激前后,与对照组相比,NCLI和MCLI对肉鸡生产性能均无改善作用(P>0.05),但可改变肉鸡小肠的形态和发育(P<0.01),增加心脏和免疫器官的指数(P>0.05或P<0.05),;(2)与正常组相比,LPS应激可使空肠、回肠的黏膜唾液酸(SA)、乳酸脱氢酶(LDH)、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、髓过氧化物酶(MPO)活性升高(P<0.01),二胺氧化酶(DAO)D-乳酸、碱性磷酸酶(AKP)的活性降低(P<0.01),血清SA、DAO、D-乳酸的活性增加(P<0.01);(3)内毒素应激处理组中,添加NCLI或MCLI,可使空肠和回肠黏膜中SA、LDH、SA、DAO、D-乳酸、sICAM-1、MPO的活性降低(P<0.01)DAO、D-乳酸、AKP的活性增加(P<0.01);2.对内毒素应激肉鸡肠黏膜内一氧化氮(NO)含量、肠黏膜抗氧化作用、细胞炎性因子和核转录因子κB (NF-κB)、核转录因子κB抑制因子α(I-κBα)表达、细胞凋亡及凋亡基因表达的影响。结果表明:(1)内毒素应激可降低肉鸡肠黏膜中巯基的含量(P<0.01),提高MDA和NO的活性(P<0.01);用NCIL和MCLI处理后则可抑制NO的产生或释放,提高巯基的含量(P<0.01),降低MDA的活性(P<0.01);(2)与各LPS(-)组相比,LPS应激可使肉鸡血清、空肠和回肠细胞因子含量升高(P<0.01),在用NCLI和MCLI预处理后,则可降低血清、空肠和回肠黏膜组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)、磷脂酶A2(PLA2)、白介素4(IL-4)和白介素10(IL-10)的含量(P<0.05或P<0.01);进一步研究发现,LPS应激可致空肠、回肠黏膜组织NF-κB的活性和IκBα的表达升高(P<.05),NF-κB p65,p50的表达上调(P>0.05),Re1B蛋白的表达降低(P>0.05);用NCLI或MCLI预处理则可降低肠黏膜中NF-κB p65的活性、κBα的磷酸化程度(P<0.05或P<0.01)和NF-κB p65,p50蛋白的表达(P>0.05),增加Re1B蛋白的表达(P>0.05);(3)内毒素应激可增加空、回肠黏膜组织中细胞凋亡蛋白酶半胱天冬酶-3(Caspase-3)的蛋白表达和bax基因的表达(P>0.05),增加细胞的凋亡率(P<0.01);内毒素应激处理组中,用NCLI和MCLI处理,可降低空、回肠黏膜上皮的细胞凋亡率、Caspase-3的蛋白表达(P<0.05或P<0.01)和bax基因的表达(P<0.05或P<0.01),提高肉鸡肠黏膜的bcl-2基因表达量(P<0.05)。