绒山羊胎儿期毛囊发育相关microRNA的筛选与鉴定

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:s4553711
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内蒙古绒山羊具有优良的产绒性状,是宝贵的种质遗传资源,因此研究绒山羊的绒毛发育机理,探寻与绒毛生长相关的重要候选基因就显得尤为重要。本研究采集了绒山羊10个不同时期的胎儿皮肤,根据前期研究结果对绒山羊胎儿皮肤毛囊启动、生长发育3个关键时期45天、55天和65天的绒山羊胎儿的体侧皮肤(相同时期的3个样本当作生物学重复)的RNA样本,等量混合后进行高通量组测序,并对结果进行生物信息学分析及荧光定量PCR(qPCR)验证。试验结果显示:1、运用高通量测序方法获得绒山羊不同胎儿期皮肤毛囊microRNA和mRNA表达数据。oar-let-7和oar-miR-200家族的microRNA在妊娠55天和妊娠65天样本中,都相对于妊娠45天显著上调,暗示其可能是毛囊发育中关键的microRNA。2、应用生物信息学分析预测oar-let-7和oar-miR-200的靶基因为GLDC、GPM6A、LRP。3、试验采用荧光定量PCR技术对绒山羊胎儿期皮肤毛囊测序结果中关键的microRNA进行验证,结果显示定量结果表达趋势跟测序结果的基本一致。4、对预测的靶基因进行验证,45天、55天、65天、75天、85天、95天、105天、115天、125天、135天十个时期预测的三个靶基因GLDC、GPM6A、LRP均有表达,在一定程度上说明了这些靶基因对于调控绒山羊胎儿期皮肤毛囊发育有明显作用。
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