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乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,近来年全世界乳腺癌发病率有逐年升高趋势,在欧美等发达国家,乳腺癌已成为女性的主要死因之一,在我国许多大、中城市,乳腺癌已位居女性恶性肿瘤发病率的首位,严重威胁着妇女的健康。目前乳腺癌的综合治疗包括外科手术切除、内科药物治疗及局部的放射治疗等手段。在内科治疗领域,乳腺癌又分为不同的亚型及相应的治疗。三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)是乳腺癌的一种特殊类型,是指 ER、PR、HER-2均为阴性的乳腺癌,临床上易复发、进展快、预后差,且因缺乏相应受体,常规的内分泌治疗和靶向Her-2治疗对其无效,治疗上十分棘手。通过临床标本的检测发现三阴性乳腺癌绝大多数ER-α36的表达很高,下调三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中ER-α36的表达后,细胞对化疗药物紫杉醇更加敏感,同时其迁移、侵袭能力明显下降,并且这些变化与雌激素是否存在无关,这些结果提示ER-α36极可能是治疗三阴性乳腺癌的潜在靶点。由于ER-α36主要表达于细胞膜和细胞质,特异性单克隆抗体可能对其有封闭中和作用进而发挥其生物学功能。如能进一步改造ER-α36单克隆抗体,可提高其生物学效应及临床应用价值。本次试验利用已有的杂交瘤细胞,经RT-PCR技术,获得抗ER-α36单克隆抗体的轻重链可变区基因。具体为从具有分泌抗ER-α36单克隆抗体活性的杂交瘤细胞株中提取总RNA,经RT-PCR扩增并克隆该单抗的轻重链可变区基因并进行序列分析。结果显示抗体的重链可变区基因438bp,属于小鼠单克隆抗体IgM重链;抗体的轻链可变区基因416bp,属于免疫球蛋白轻链,且属于κ链的可变区基因。通过RT-PCR所克隆的基因经核苷酸序列分析,为抗体的轻重链可变区。该轻重链可变区基因的克隆和序列分析为抗ER-α36单克隆抗体的基因工程改造完成关键的一步。